神经干细胞相关文献和自己的图片

smkx

最近在分离培养猪的室下区和海马区的神经干细胞，大家帮我看一下图片（附文献），这是原代培养svz后取长成集落的细胞，消化吹打成单细胞后继续培养第三天后的形状，为什么是这种形状呢（不是传统的神经球的形状）

qingnuanrenxin

太好了

get0715

DMEM [Sigma], 1×B27 [Gibco Invitrogen], 200 U/mL penicillin and 200g/mL streptomycin [Gibco Invitrogen]) containing 20 ng/mL Epidermal Growth+ ^/ t) y( F+ z; J; _5 d
Factor (EGF, Gibco Invitrogen) and 20 ng/mLbasic FibroblastGrowth/ o: D7 o$ t; `  @) C, H
Factor (bFGF, Gibco Invitrogen).9 V& M2 u7 t1 y( j! ]  l6 u
我用的是DMEM/F12[Gibco Invitrogen],，不知道是不是基础培养基有一部分影响。从图片看细胞的大小不是很均一，是不是已经有细胞的状态不好了，可以用苔盼蓝做一个细胞活力计数。
6 P1 q8 `* D/ c6 F& B1 W原代培养出的细胞是呈球状的么？如果原代是神经球，可能是传代的方法出现的问题了。

smkx

回复 2# qingnuanrenxin
: p9 N- \8 ^4 v& X. P' R" s, J- r
0 D' m4 o8 r0 c* Q* \- Z
, s9 t9 v5 G  i1 C9 d8 Y: x7 z* Z6 N" b    怎么好？我觉得不好，呵呵

smkx

回复 3# get0715
4 g8 Y5 F, Z3 w+ y7 \! O4 x/ [  _* `' T& ?

$ [) r& M; q: `    问对了。原代挑取的时候就不是文献神经球的形状，仍然是图中诡异的形状。也想过台盘兰计数。谢谢你！感觉这不像神经干，但又不知道是什么细胞。能增值，能传代。

get0715

那原代都不是球状的，传代更不可能是了。( J% }( [/ E; H, h" ~* _, \
第一：你分离的是从成体还是胚胎的组织？室下区和海马区，前者我不太了解，但如果你分离的是海马区（但不要带有其他多余的组织），就应该可以分离出较纯的神经干细胞。' m( x. D5 r- I( b* J% V
第二：从培养基的配方上找原因。: L5 K; w* i) E. v
第三：就是传代方法了。

smkx

回复 6# get0715 & m' H( F7 x4 T# I4 s
$ y; h$ _4 t0 e; ~& `' \. ~
9 S1 F4 {" G) C3 a  n: m' e: }
   是2个月大的小猪室下区的图片。至于海马区，也有类似的形状。偶尔可见球状集落。但是这种形状的非常普遍。不知道你实验中遇见过没？传代方法就是用口吸管吸取的方法。培养基是文献中的那一套体系。

get0715

因为我分离的是胚胎脑组织，可能较好培养吧。先从分离的组织入手吧，把外部不属于海马组织的多余物除干净。如果还是不行就改改培养基的配方，可以改用大多数培养神经干细胞的DMEM/F12，2%B27，20 ng/mL EGF，20 ng/ bFGF。要多参考些文章，用大家比较常用的方法，如果行不通再改成个别的方法。
9 a% r% M9 f4 T$ _4 Z2 i# R

qingnuanrenxin

敢拿出来让大家帮你看看就是好的，因为这里专业人士多啊

iseeyou1210

very good point!