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脐带提取间充质干细胞主要影响因素   [复制链接]

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楼主
发表于 2018-9-27 08:55 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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求助:最近从脐带提取间充质干细胞总是失败,原代细胞养不起来,有时候提不出来细胞,想问下各位大神,做原代提取的时候应该注意哪些问题呢?

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沙发
发表于 2018-9-29 14:34 |显示全部帖子
回复 uslzhang 的帖子
2 P# a: i7 c5 a0 Y  q# X( X. K* _. }5 f& y4 f! O+ {
用的是酶消化法,是选择先把脐带外皮拔下来,然后剔除血管,剪碎华通胶,胶原酶消化3h,但是细胞状态特别不好,基本长不起来,血细胞会影响间充干贴壁吗

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藤椅
发表于 2018-9-29 14:36 |显示全部帖子
回复 wsd950628 的帖子
, d$ a7 R; C+ e  @- k/ W# L/ a& B. M& p! h8 Y4 N7 |# b- r/ c2 G; z4 L
恩是的,用的是酶消化法,组织块法也用了,但是爬细胞的时间很久,爬出来的细胞也不是很好,长不起来,长两天就分化了,或者消化传代,细胞不贴壁,然后细胞就会死亡。

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板凳
发表于 2018-10-12 10:58 |显示全部帖子
回复 gengtongyu521 的帖子) [( r/ Z1 g. z: i/ a$ A

, o6 i8 U" b0 }( j3 t! H6 q不用胶原酶消化?那用什么?

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报纸
发表于 2018-11-15 15:30 |显示全部帖子
回复 卓俊文 的帖子
0 d/ u# e2 {: R8 T; M9 k% u' P. }' a6 O& P; Y+ A/ Y
胶原酶浓度是1%的I型胶原吗,消化时间三个小时,另外我想问下,你们用的离心力都是多少?离心力过高会不会导致细胞不易贴壁?

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地板
发表于 2018-11-15 15:31 |显示全部帖子
回复 xiaolu19781999 的帖子
8 m1 P3 K0 F  P. R9 }! o4 {% k4 Q5 g5 j* c7 h0 A; I
换了新的培养基,用的是血替培养,但是最近总发现培养基有白色絮状物吸出。

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发表于 2018-11-15 15:33 |显示全部帖子
回复 gengtongyu521 的帖子
6 D8 O! ]# ~$ L1 `: B  h
' c" f( ~1 p8 N" l) f6 i8 P) U' c1 ~我们主要是用酶消化法,很少用爬块法,而且我们用爬块法爬出的细胞状态也不太好。你们用爬块法一般几天能爬出块呀
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