一次失败的脐带组织贴壁法尝试

hawkyiger

腐烂？就算腐烂也是由于微生物污染造成的啊。。。首先注意无菌操作，在剪碎铁壁之前用含双抗的纯水多洗几遍；组织块尽量剪得小一点，铺的密度稀一点，贴完之后可以过一周再动它。有的时候感觉没有希望的贴壁组织块可能一段时间后就分离出一大片细胞。

hawkyiger

回复 5# 5784630 ! o1 V5 m$ x  p: N. |/ ~( o. J; K

! V3 Z/ E1 h  g9 ]4 h& W! S) ~0 F9 y其它的也没什么了，只是贴壁的时候要尽量剪得细一点，铺完后先不要着急加培养基，否则一加就会冲起来了，而且加的时候要尽量小心，控制一下加的力度。程序上就那样，但很多时候还是跟脐带有一定关系的，并不是每根都能得到好的结果

hawkyiger

回复 7# wshzhoum " I) f5 p: C4 a7 m5 v
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这就属于脐带状态的问题了，因为你说的那种情况在制备脐带的时候就能看出来，会发现脐带一段一段呈油乎乎的状态，在前期把那些部分舍弃就可以。如果整根脐带都这样，那就可以不做嘛。

hawkyiger

回复 10# wshzhoum ( v2 p# ~3 |/ W! U8 P$ ]6 d$ T

1 n. N( t6 e0 z% I8 x" U. f感觉必要的话先用胶原酶消化一下，然后在离心取组织块铺平

hawkyiger

回复 11# xiegm 4 @0 Q0 C4 }6 R, w7 M

, D$ P( l  q- ]- R; H. d要想完全均匀铺平是不太现实的。华通胶既然是一种富含粘液的结缔组织，那么剪碎的组织块会聚集在一起。你可以用一个无菌的刮刀或其他东西慢慢的分一下，还是那句话：你不用指望所有的组织块都均匀大小，均匀铺开，只要有一部分较小的不连在一起的组织块铺开就可以了。小心处理，只要有一些组织块能够分理出细胞克隆就算成功了。