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路过的大哥大姐请进来帮个忙。关于鼠ips细胞保存培养传代的方法~   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-4-27 12:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
各位大哥大姐,我老师准备弄点ips回来养,叫我查找鼠ips的保存培养传代方法,明天向他汇报,小弟现在大四,以前对ips一无所知。我把具体要求写在后面,各位前辈谁知道的,帮个忙啊~不甚感激~!
1 b% R1 C# w  Z* r  Ips:鼠ips细胞保存的方法,跟一般的细胞保存方法有没有区别或特别需要注意的地方?. K9 D6 ~8 g5 w5 a+ Z# Z# p
     鼠ips细胞培养的方法,跟一般的细胞培养方法有没有区别或特别需要注意的地方,需要购买哪种培养基或者其他试剂?
; K( E& p" J  _* Y* Y     鼠ips细胞传代的方法,跟一般的细胞传代方法有没有区别或特别需要注意的地方,各位在传代的时候有什么好的经验和建议?# ?( k" e+ H& J  E8 ^: S
ps2:我们实验室有人做内皮细胞
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包包
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沙发
发表于 2010-4-27 13:22 |只看该作者
刚刚看到几位做鼠ips的前辈 无奈现在权限不够不能发信 ! s& `" c: |: j) ?9 A' X: V6 e
希望早点出现好心人 谢谢了

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金话筒 优秀版主

藤椅
发表于 2010-4-27 14:29 |只看该作者
建议看文献或者去哪里接受培训!

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小小研究员

板凳
发表于 2010-4-27 14:32 |只看该作者
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包包
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报纸
发表于 2010-4-27 14:37 |只看该作者
回复 4# 细胞海洋
; }# Y- b& o) Z: @5 I3 [9 d; P) b
谢谢您!我已经去加了

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地板
发表于 2010-4-27 14:40 |只看该作者
[b]回复 [url=http://www.stemcell8.com/redirect.php?goto=findpost&pid=109555&ptid=20345]3#[/url] [i]大猪小猪落玉盘[/i] [/b]7 J4 {$ ]+ `- Q5 x. l1 H) d

; L2 _8 p) |: D. g. ]" `$ r/ _/ a1 p
    恩,这都是准备做的事情。不过眼下当务之急是希望能有师兄师姐给我指导一下。:)

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包包
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优秀会员 金话筒

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发表于 2010-4-27 14:48 |只看该作者
回复 2# leidaoxi
, S  }6 \) t; ]4 N- }: E; f
# \, D9 ]1 O/ L. t  n以下意见仅供参考:
  I/ L0 A5 i0 b- }' d1、鼠ips细胞保存的方法跟一般的细胞保存方法没有区别.2 n" G, n- d; f3 }  T+ c
( Q9 a; p/ J1 y
2、iPS细胞冷冻保存产品Y-27632
4 n: a$ Z; l9 Y; T1 S〔是具有选择性的强力ROCK(Rho-associated coiled-coil forming kinase/Rho结合酶)抑制剂,可提高人类iPS细胞冷冻保存后的复活率和基因复制效率。)
/ H+ w- F0 w( i8 p% r9 U) y
* i% p1 Y' x+ F% }; K特点:
% s$ z! |  [4 w3 B& z2 R纯度98.0%以上(HPLC);价格低廉
6 n: @! p7 q! E( G! f, P( P  j# u
' R2 X8 o9 Q) r9 @8 `0 F: i( J  L( x4 l, Z$ w: R
产品编号        品名      规格
# ?* E% [! |8 T1 w257-00511   Y-27632    1mg
( }0 t1 r3 C2 ~6 c4 [7 z  J253-00513                  5mg . V# c! {- {/ n* Z+ y
* Y1 y  C# \% g8 N" z- |
实验步骤% y& @5 Z; d: ?, q0 F1 Y
①hESCs maintenance culture3 R$ g1 ^+ R1 I$ S* T5 E% j
0 P) a8 {' N' z6 D- J2 ]
②Dissociated hESCs splitting in the presence of 10μmol/L Y-27632; T" a# v1 B, Q5 o! X
7 l' L' \( m/ ~
③Slow freezing of single hESCs in the presence of 10μmol/ Y-27632
& ~7 o- g7 l# z6 y& Y# g9 d, ]0 |: I& I' I# o
④Thawed rapidly in 37℃ bath
7 `( j; a& o' r; h1 g) L; O1 r7 x4 e5 s) L5 r
⑤Seeded in hESCs maintenance medium in the presence of Y-27632" G4 X1 r& J1 d; r- O- Q
( o" N5 H$ n% K2 C6 ^( ~5 x+ Y7 e
3、其他情况请下载附件。4 i: F0 `7 a+ k: F. E8 {1 ]
! X8 t1 W  q0 _
, y2 g7 A% [$ N  S% F+ i- N0 q7 H

6 i, J7 j9 I# p0 I, I3 K
+ Q  C! w' r! E1 J+ S2 J2 l
# A# |' q& K% M% _. U! `" E6 R& ^1 v' _1 D
/ m+ q. f$ }; @; f, a4 J3 A. ?
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发表于 2010-4-27 15:03 |只看该作者
花了好多的包包下载啊

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发表于 2010-4-27 15:07 |只看该作者
回复 7# grape
% W9 A/ x1 _; Q3 q. {7 H' P2 ^/ t
- {! Q& m3 M, n1 o
   
2 i4 d; @( q" `1 Q9 p. U我太感谢你了! 我先消化一下 不懂的再请教 谢谢!:)

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发表于 2010-5-12 14:34 |只看该作者
和小鼠ES细胞的培养差不多,不知道楼主养过ES没?注意防止分化
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