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细胞在诱导过程中传代好还是不传代好?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-4-29 14:27 |只看该作者 |正序浏览 |打印
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我在做BMSCs向成骨和内皮方向诱导的实验。
, X/ }* w! w2 Z8 V, r) A
- Q" @9 R  n+ e现在听到两种说法:. L8 l/ D1 l: r
一是在诱导过程中细胞可以不必传代,细胞融合100%后会停止分裂而易于分化。待诱导结束后再传代即可。- u/ A8 X: g* w9 ~, V2 K
二是细胞在诱导过程中也会生长,应及时传代,否则对细胞分化潜能不利。
/ \: ]. |) b4 W8 h# P2 D' W5 |- }! q8 T4 k$ M) N2 ~% B
现在很困惑,细胞在诱导过程中,到底要不要传代呢?
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发表于 2010-11-20 23:41 |只看该作者
回复 6# bypw ; I+ R) e) n! x4 V7 _9 h

( x. ^" |. |3 P9 [; K
- u- W% a: V) E0 U, @  在做分化时,应注意铺板密度。如每个六孔板中加几十个小的克隆。
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发表于 2010-11-16 20:43 |只看该作者
个人觉得如果诱导转分化过程传代是不好的。首先,就是楼上的同学说的,无论何种诱导剂作用过程和胞膜生理活动肯定都是有关的,要么信号传递,要么是化合物的直接转运,要么是内吞之类。消化过程会影响胞膜生理状态。其次,如果传代种板了,最后的转分化效率如何计算呢。我做间充质干细胞转分化,转分化的细胞不见多,间充质干细胞却疯长,个人觉得首先应该在种板后待细胞铺板90%的样子就降低血清含量或尝试去除血清,我们的目的是让它分化,过多血清会让细胞生长过快。不过撤了血清不知道细胞生长状态会不会变差,有待尝试。
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发表于 2010-11-10 04:53 |只看该作者
回复 10# xxzhang83 " M7 s% c' {8 V
1 `7 Y9 U. N0 g8 O  |( X) Q

  n- w9 E* E6 q  H3 o    学习

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发表于 2010-7-1 10:43 |只看该作者
我对这个问题也很好奇啊,我们在诱导MSCS像胰岛细胞分化的过程中也没有传代,但是在诱导培养一段时间后,MS ...
- }' \7 z( f" b; @1 x1 |) k' z. Kbypw 发表于 2010-5-9 10:11
6 j7 G4 [" O- i
; m2 Y% G. M4 P+ v- c5 t
8 a4 t1 D) T3 c( d; T8 F
    我最近也在做向胰岛细胞诱导过程中,也发现细胞突然大量增殖,在六孔板中呈环状密集生长,也有大量细胞漂浮,郁闷中
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发表于 2010-6-17 17:42 |只看该作者
mitomycin C处理后,对细胞的状态会不会有影响?会不会影响分化啊?看来要好好看看你说的这个文献
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发表于 2010-6-5 16:48 |只看该作者
我很想知道到底要不要传代,我也专门请教过做的很成功的前辈,他给的回复是不需要传代,跟8楼的说法一致,抑制其增殖有利于分化。我也觉得做个对照会很好的吧
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发表于 2010-5-20 22:36 |只看该作者
传代的目的是什么?我认为诱导过程中一般情况是不用传代的,至少我们是这样做的,但没做过成内皮分化。
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发表于 2010-5-17 20:53 |只看该作者
这个问题就很宽泛了,可能不同的实验室,不同的人对此都会有不同的看法,在我看过的文献中,没有明确的提及是否传代。参照7楼的意见,你可以作一个对比实验,要注意实验条件的控制。个人觉得,如果传代与否对下面进行诱导分化影响不大的话,还是建议不要传代培养,因为在以后的研究与应用中,传代成本肯定要高,不划算。
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发表于 2010-5-13 21:21 |只看该作者
最好不要传代,诱导后再传代就会影响分化!
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