干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 细胞在诱导过程中传代好还是不传代好？ [打印本页]

作者: xxzhang83 时间: 2010-4-29 14:27 标题: 细胞在诱导过程中传代好还是不传代好？

我在做BMSCs向成骨和内皮方向诱导的实验。) m9 x: p5 Q. g- T! }, Q5 b3 ]6 E
' R3 v! L1 D3 |0 J) \! ?/ c3 s* Q3 ]
现在听到两种说法：4 K1 ]' {$ n1 P9 X
一是在诱导过程中细胞可以不必传代，细胞融合100%后会停止分裂而易于分化。待诱导结束后再传代即可。+ M4 T+ C2 _' A1 f! v
二是细胞在诱导过程中也会生长，应及时传代，否则对细胞分化潜能不利。) B3 `' I+ ? Z$ C# P$ U+ {
- c8 d& |( o6 s( n: f. Z
现在很困惑，细胞在诱导过程中，到底要不要传代呢？

作者: nhzxcsc 时间: 2010-4-29 18:14

帮你顶起，我也想知道这个问题的答案，我根据我的经验，反正成脂，成神经之类的是不能传代的，其他的就不清楚了

作者: xxzhang83 时间: 2010-4-30 00:00

传代是不是对分化不利？

作者: jiejesse 时间: 2010-5-5 23:28

一般是不传代的吧。想一想你诱导时家的东西是通过膜受体途径还是其他途径就可以知道了呀，如果是膜受体的话那肯有很大的影响，当然其他途径也会有一定的影响。个人浅见

作者: missyoudad 时间: 2010-5-7 19:18

不用传代的

作者: bypw 时间: 2010-5-9 10:11

我对这个问题也很好奇啊，我们在诱导MSCS像胰岛细胞分化的过程中也没有传代，但是在诱导培养一段时间后，MSCS 会出现大量的生长，最后会大片脱落，等到要鉴定时，细胞量很少，我也在想在诱导过程中需不需要传代啊，我看了外国的文章他们好像也没有传代啊

作者: wlandragon 时间: 2010-5-9 15:34

细胞诱导形成不同的组织应该不同步，建议你可以分二组做试验比较下，并做细胞档案记录，如组织来源、生物学特性、培养基的要求、传代换液时间、扩增时间等，比较一下看哪种说法对你的实验进行更有利，个人看法
。

作者: yxp 时间: 2010-5-11 16:40

我在一篇文献中看到，作者再诱导BMSC分化前用mitomycin C处理细胞，抑制其增殖，然后再开始诱导进程，楼主是不是也可以考虑先处理细胞抑制其增殖然后再诱导分化呢？
5 o+ l9 I' o& _1 f$ w* n
文献：Injectable biodegradable hydrogels with tunable mechanical properties for the stimulation of neurogenesic differentiation of human mesenchymal stem cells
in 3D culture% N( J8 I, S! g, a
2 z. g- N" p3 V* ^6 V* r4 A
不会贴文献，谁能告诉我一下？

作者: zhangl 时间: 2010-5-11 16:59

回复 8# yxp

用高级模式加附件即可

作者: xxzhang83 时间: 2010-5-12 22:56

我在一篇文献中看到，作者再诱导BMSC分化前用mitomycin C处理细胞，抑制其增殖，然后再开始诱导进程，楼主是 ...
! \: `; C8 O5 L& e4 Tyxp 发表于 2010-5-11 16:40

0 @/ U4 h" ]8 V# b

多谢，我已经下载，学习一下~~

作者: yanxuebo1979 时间: 2010-5-13 21:21

最好不要传代，诱导后再传代就会影响分化！

作者: wujinglei 时间: 2010-5-17 20:53

这个问题就很宽泛了，可能不同的实验室，不同的人对此都会有不同的看法，在我看过的文献中，没有明确的提及是否传代。参照7楼的意见，你可以作一个对比实验，要注意实验条件的控制。个人觉得，如果传代与否对下面进行诱导分化影响不大的话，还是建议不要传代培养，因为在以后的研究与应用中，传代成本肯定要高，不划算。

作者: dragon513 时间: 2010-5-20 22:36

传代的目的是什么？我认为诱导过程中一般情况是不用传代的，至少我们是这样做的，但没做过成内皮分化。

作者: 林建 时间: 2010-6-5 16:48

我很想知道到底要不要传代，我也专门请教过做的很成功的前辈，他给的回复是不需要传代，跟8楼的说法一致，抑制其增殖有利于分化。我也觉得做个对照会很好的吧

作者: mikeli 时间: 2010-6-17 17:42

mitomycin C处理后，对细胞的状态会不会有影响？会不会影响分化啊？看来要好好看看你说的这个文献

作者: Mrlonelyll 时间: 2010-7-1 10:43

我对这个问题也很好奇啊，我们在诱导MSCS像胰岛细胞分化的过程中也没有传代，但是在诱导培养一段时间后，MS ...8 I& P5 [2 R/ o
bypw 发表于 2010-5-9 10:11

3 ~% g! W, b" h* x0 i. t" Z& k
$ _/ G1 C; [8 e: g4 E' {/ k" W1 q5 J
我最近也在做向胰岛细胞诱导过程中，也发现细胞突然大量增殖，在六孔板中呈环状密集生长，也有大量细胞漂浮，郁闷中

作者: 桥下流水 时间: 2010-11-10 04:53

回复 10# xxzhang83

学习

作者: 若兰汀 时间: 2010-11-16 20:43

个人觉得如果诱导转分化过程传代是不好的。首先，就是楼上的同学说的，无论何种诱导剂作用过程和胞膜生理活动肯定都是有关的，要么信号传递，要么是化合物的直接转运，要么是内吞之类。消化过程会影响胞膜生理状态。其次，如果传代种板了，最后的转分化效率如何计算呢。我做间充质干细胞转分化，转分化的细胞不见多，间充质干细胞却疯长，个人觉得首先应该在种板后待细胞铺板90%的样子就降低血清含量或尝试去除血清，我们的目的是让它分化，过多血清会让细胞生长过快。不过撤了血清不知道细胞生长状态会不会变差，有待尝试。

作者: nculsa747 时间: 2010-11-20 23:41

回复 6# bypw 6 J1 N! f; R% v% A% I/ r* z; O
6 a0 q9 m0 ], s6 b1 ~0 f

在做分化时，应注意铺板密度。如每个六孔板中加几十个小的克隆。

欢迎光临干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://www.stemcell8.cn/)