肿瘤干细胞基因表达情况的分析

jitianxing7021

战友们4 t( ^8 U. ~. Q  ], A* \0 o
我最近利用球培养筛选干细胞; q9 c4 b8 u1 G: L, L# i
最近RT-PCR 结果表明筛选的球形成细胞干性基因的表达水平低于原来细胞株

hcoohboy

回复 1# jitianxing7021 $ C2 Z1 ?: T5 O! s
& c/ j) y4 V! M* R) Z3 f
1 e+ k5 G4 C  N- R# h0 P" P7 W# Q
    1. 首先是否确定你的球培养体系成功建立？& ]) P$ Y0 N8 Y
    2.你选择了哪些些干性基因？可能不是所有的干性基因都会上调
+ o1 [. w4 A: ?- A; c# j" A    3. RT-PCR存在假阳性，再重复试验或用免疫荧光检测" f7 Y/ M1 ^% b9 B' K! c9 p6 ^8 \

3 |6 B  ~$ l2 t# e( h) r. M个人建议

jitianxing7021

回复 2# hcoohboy
3 F; b$ v' y& x( U
1 P% i2 }* n+ a1 U. s/ R6 X; s! A/ o$ j( w2 e; R' D$ n
    我的干性包括BMI-1 NANOG,NOTCH-1,ABCG2: R+ B3 U! c! K) N
    我在想是不是接种的细胞密度有关系了 5 C+ u; H. n" K
  我的球细胞已经传代了二十代了
7 U) B3 s3 |+ q6 D/ J应该建立起来干细胞

jitianxing7021

免疫荧光做了一个beta-catenin. B% M  f* C, |6 {
发现成高表达，在细胞浆和细胞核内

hcoohboy

回复 4# jitianxing7021 6 y& ~. r: x! I. k4 Y3 M5 e+ i
% M9 ]* o* @+ L
( d0 n, N1 p( K/ k! u) _
    这个结果还是不错的！

hcoohboy

回复 3# jitianxing7021 " a% R) b. s& Y* i! v8 ?$ \

9 u8 V" c  @' l) F
7 h* I  z1 w2 ?& \9 e# a    试一下向裸鼠皮下打瘤，这是金标准

jitianxing7021

是的2 ^( k; @- @5 o; z' X3 B8 J
这个说的对！但是我想把基因表达做好( j" B- E7 {: _- s' b2 D
因为现在功能试验已经没有新意了
4 R6 T: U9 f" O3 _现在关键是能找到肿瘤干细胞特异的表达因子

xiongliangxl

学习关注中~希望楼主继续汇报实验进展~顶~

hcoohboy

回复 7# jitianxing7021
3 ~; O+ w  E) T5 b* Y: o$ \( ^+ W  @4 B) W& |8 N

( j& H' j: T! K* Y    但这个比较耗神，可能最好做芯片，才能筛到新的调控因子什么的~

wzx6660

支持，很有参考价值