肿瘤干细胞基因表达情况的分析

jitianxing7021

战友们
; o7 U: X9 z& o+ ~我最近利用球培养筛选干细胞
  j0 b" M2 Y& b6 U0 `8 }最近RT-PCR 结果表明筛选的球形成细胞干性基因的表达水平低于原来细胞株

hcoohboy

回复 1# jitianxing7021
4 N) F/ G& Y  J' C3 c- |
2 ]3 o2 e. E$ V/ |- I: `) s4 t
' c" b1 o6 e0 a/ z    1. 首先是否确定你的球培养体系成功建立？
7 t) g4 H) N$ h* g: P+ D/ X6 X: R    2.你选择了哪些些干性基因？可能不是所有的干性基因都会上调* O- f. ~  [) _8 Y) A9 J% ]
    3. RT-PCR存在假阳性，再重复试验或用免疫荧光检测: f9 `. C  M7 j7 M; t

# R& Z4 z: E0 |. ~" Y8 q% H个人建议

jitianxing7021

回复 2# hcoohboy
, R. k  m% w; q* r
1 k7 M/ v) ]" i# N9 v3 ]! R: G5 i" e- T$ A& r5 U1 Z1 X6 v
    我的干性包括BMI-1 NANOG,NOTCH-1,ABCG2
2 o: j- ]# X( k7 N    我在想是不是接种的细胞密度有关系了
) N4 m8 A, `' V" j3 Y3 q# J7 }# s  我的球细胞已经传代了二十代了; G4 M! {. P8 I  t" S
应该建立起来干细胞

jitianxing7021

免疫荧光做了一个beta-catenin
; ~6 s3 M+ t$ u2 q发现成高表达，在细胞浆和细胞核内

hcoohboy

回复 4# jitianxing7021
* T  I  J! V; u1 @4 G
2 V: N& A4 M* ?, `* W7 a$ u, _/ y8 ~; v
    这个结果还是不错的！

hcoohboy

回复 3# jitianxing7021
, j* H; h  y& v' d" R9 w5 ?7 g
% f% e- ?$ L" x' f; \* j* X0 B. y, f8 T/ F# z  y9 \6 o. v4 m
    试一下向裸鼠皮下打瘤，这是金标准

jitianxing7021

是的, N% c; r& N4 ^6 k% o
这个说的对！但是我想把基因表达做好$ l4 k# \+ `2 X# E6 ~
因为现在功能试验已经没有新意了9 I7 L' Q9 F/ o* M
现在关键是能找到肿瘤干细胞特异的表达因子

xiongliangxl

学习关注中~希望楼主继续汇报实验进展~顶~

hcoohboy

回复 7# jitianxing7021
* O. a- R, I# z- y5 B
4 ^% w" Y, N% |! M/ P# a6 _$ X* L& ^2 X; H
    但这个比较耗神，可能最好做芯片，才能筛到新的调控因子什么的~

wzx6660

支持，很有参考价值