肿瘤干细胞基因表达情况的分析

jitianxing7021

战友们
. j  W1 X: b6 c( [我最近利用球培养筛选干细胞
/ f( P$ U/ r0 |' W" x最近RT-PCR 结果表明筛选的球形成细胞干性基因的表达水平低于原来细胞株

hcoohboy

回复 1# jitianxing7021 % {( @2 J' n5 c8 V) Q

2 q! T8 U: j" l7 v
: I) G4 ^# U; t0 x    1. 首先是否确定你的球培养体系成功建立？" O  N  g0 Q2 N; A0 X* T& }8 }3 i5 r
    2.你选择了哪些些干性基因？可能不是所有的干性基因都会上调* P  M! J* R. A5 b4 I( A5 w
    3. RT-PCR存在假阳性，再重复试验或用免疫荧光检测4 u' v6 {3 }0 F7 T2 O1 i

( Q/ {! u! T* T1 S% G. J, r( G( a8 d个人建议

jitianxing7021

回复 2# hcoohboy 1 t+ A8 W. T7 `1 c

8 Q  s& t5 B, S/ }
/ ~6 l9 T; e5 N* ~, U    我的干性包括BMI-1 NANOG,NOTCH-1,ABCG2& F3 x4 Z9 Q/ }
    我在想是不是接种的细胞密度有关系了 4 l$ C# f7 x; {4 }0 f# e2 Z
  我的球细胞已经传代了二十代了8 Z( }# W1 x- Z" A
应该建立起来干细胞

jitianxing7021

免疫荧光做了一个beta-catenin1 u( m5 `7 o# X  n( T
发现成高表达，在细胞浆和细胞核内

hcoohboy

回复 4# jitianxing7021 % D, Q; i% {8 p- E5 w3 J: \4 G$ W

; Q8 @, R+ C  `0 u/ x4 g5 k/ Y) `* c9 M& _
& P$ U6 f& B8 T4 \1 k1 G    这个结果还是不错的！

hcoohboy

回复 3# jitianxing7021
7 Z+ H" K- s- y0 b+ X8 s% F% E! K0 z+ K8 @6 M8 P
. Z3 w' E1 g2 Z2 }7 \  F
    试一下向裸鼠皮下打瘤，这是金标准

jitianxing7021

是的
6 _6 U9 `1 |$ ?这个说的对！但是我想把基因表达做好
% U5 L  t1 g# Z/ z$ y! o因为现在功能试验已经没有新意了
$ D7 j3 }, X5 o& F' P. m) |( x现在关键是能找到肿瘤干细胞特异的表达因子

xiongliangxl

学习关注中~希望楼主继续汇报实验进展~顶~

hcoohboy

回复 7# jitianxing7021
5 s5 H* N% x  c# w0 X, A! L0 _1 }1 D" `

9 n  M. W) Z7 J7 q! w! ]* ~    但这个比较耗神，可能最好做芯片，才能筛到新的调控因子什么的~

wzx6660

支持，很有参考价值