骨髓间充质干细胞的鉴定！

yanxuebo1979

本人目前正在做骨髓间充质干细胞的鉴定工作，但是结果和文献正好相反，CD44表达较少而CD45表达较强，不知道哪里的问题，可能是纯化不够

待鹤

定是污染了造血干细胞，改进纯化的操作步骤。

zsc78

把你的实验步骤拿出来看看，应该是造血干细胞污染。

luluegret

请问您养的是什么来源的骨髓间充质干细胞？用的鉴定试剂是哪家的？
/ U6 i2 |& j* t$ U, s: k7 t, b" `还有，您采用的是那种培养方法？是全骨髓还是离心的？

illidancui

我过一段也要做BMSCs鉴定，用的全骨髓贴壁法做的，希望能了解一下上边所说的“造血干细胞污染”是个怎么情况？如何避免一下。
5 ]5 w$ O# \9 |# ~还有一般鉴定的marker选几个,CD44,CD73,CD105,CD14,CD34,CD45，我只是实验前进行一下鉴定，这些marker应该不用都做吧，还望高人多多指教。

helenkim

你做的是人、大鼠还是小鼠来源的MSC？不同种属鉴定的marker不同：
4 {+ e$ y5 D+ {. W% C6 F人：CD31、 CD34、 CD45、MHC II、CD14 、CD29、CD40、 CD73、 CD105、CD166
. y* `* X" C  `: F, |2 `大鼠：CD34、 CD45、CD29、CD44、CD90
0 J$ R9 {8 w& B! o6 k小鼠：CD13、CD29、CD44、CD90、 CD117、Sca1、Flk1、MHCⅠ、MHCⅡ、CD45、Cy5
, D5 g/ A9 ~, t0 t' q我个人觉得最少得测5个，3个阳性，2个阴性的，这样才能说明问题。

xiongliangxl

楼上很强~感谢论坛感谢楼主~顶贴~

illidancui

谢谢楼上上，鉴定方面我只看了中文方面的文献，虽然都是做的大鼠，但文献中用的marker却各不相同（cd40，105都有用到），小弟再研究下相关的英文综述。再次感谢。呵呵。

yanxuebo1979

我用的是大鼠的骨髓间充质干细胞，采用的是离心和贴壁法！我直接用原代的进行鉴定，会不会是被血细胞污染？因为红细胞表面就表达CD45！

illidancui

文献中都是3代才鉴定的吧，原代应该其他细胞会比较多吧。