ficoll

flyyoyo

我想请教一下，我用ficoll分离脐血单个核细胞得率总是比较低，会有哪些影响因素？谢谢！

panda44

剛剛在另一個貼也發了的，希望大家幫幫我4 o- ]4 p- Q7 g' W
謝謝啦
5 E# Y$ W& B: Q5 K! J我不知道相關的資源應該在哪裡查找
+ D) R0 {& I& o" _" {9 V* [% u' s* i/ x* J
我剛剛進實驗室
- a& e, C( B4 S4 ~) t* l6 S3 N0 A8 `實驗室才開始做幹細胞這塊的實驗; M9 c9 a' E8 ^3 {
不知道各位大大可不可以告訴我拿到臍血后怎麼分離出造血幹細胞并進行培養+ h8 l. L2 `& Y% K6 ]% K; N0 I
分離，純化的方法，還有培養的方法...- A3 E4 a! d7 O" l
需要些什麽材料，或者可不可以提供我相關的文獻或資源，謝謝各位了  X7 G8 h% O  Y- u9 b
拜託拜託！

香瓜瓜

用ficoll分离脐血单个核得率本来就不高的，除了操作和离心等，和脐血本身的质量也有关系。不知道战友们有优化的办法吗？

xbs530515

这个方法，已经很成熟了啊，很多实验室都在用。可以多查查，个人建议在离心时间和转速上可以摸索一下，可以做作对比。

hanchao

ficoll 的使用温度要求很高的，一般要控制在20°左右~温度会直接影响密度，进而影响你的提取效率。还有就是一定要是水平的离心机而且brake=0，再一个就要尽量缩短样本存放及操作时间。希望对你有帮助。

dwl1209

我想知道ficoll和percoll分离的区别，哪个效果会更好些呢？

zuming

保证温度，按说明书上的温度操作。$ {+ R& L/ V* q5 B2 F4 P
把离心机的加减速速率调到最低（特别是减速）。" F9 g6 I, U: [5 E0 `$ m1 {
有一种细长的离心管用来做ficoll不错，在吸取目标层时很有用。% Y- q* E! y5 [5 \2 X' r
然后就是整个过程要轻缓。基本上注意的就这些。

vivian303

铺血的速度一定要很慢，不要破坏界面，离心的时候要采用自然降速，上升速度也要调整为slow，转速我前段时间做了，影响不是很大，其实得率本来就很低

pauldong

ficoll离心脐血单个核的回收率确实不高，很多白细胞会沉积到红细胞层，除了楼上说的几个关键因素，我个人认为，吸取中间层时的操作也很重要，尽量多吸白细胞层，但要避免将红细胞吸入，这个是技术活，需要长时间的练习

killua

除了方法本身和操作等原因，还有跟离心机的质量和升降速曲线有关, |+ d! n% D( G  ^: R6 U9 {0 @  x
一。升降速曲线设定要慢
7 [0 _& S, D5 `5 s& l二。国产离心机有时候离心力达不到要求。我们之前也碰到这样的情况，一开始用国产的，分层效果很差，后来换进口的，同样转速和离心力效果完全不一样。不是我崇洋媚外，但国产仪器有时是不行，具体牌子我就不说了。