神经干细胞冻存液为什么要加胎牛血清？

huangfei2010

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10%），我的疑问就是正常神经干细胞培养液是DMEM/F12，EGF,b-FGF,不加胎牛血清的，为什么冻存的时候把生长因子撤掉，换胎牛血清？胎牛血清是诱导分化的啊，虽然液氮保存细胞基本不代谢，可是为什么文献上冻存时都不要生长因子了呢？小弟才疏学浅，刚开始养神经干细胞不懂其中道理，还请大家帮忙分析下。谢谢

xzmcyy@163.com

我冻存仅用胎牛血清加二甲基亚砜，原因没有仔细想过和查过，因为是实验室一直那么做的，而且效果很好，我会查下原因

iseeyou1210

你可以看看这篇文献，他们只是用medium w/o EGF and FGF +15% DMSO来冻存 neurosphere的。7 |  M$ t4 \4 U9 `5 g* o4 Y
http://www.natureprotocols.com/2 ... l_culture_neuro.php

huangfei2010

回复 2# xzmcyy@163.com 6 H+ W# }! i3 [! J
/ C& l: f( A! y& E
谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210 - R: M. @( J- Q1 x9 M6 Q

2 D. d. T7 _2 h5 w5 }6 D$ c& g7 J3 ]( I' B) D
    谢谢回复

huangfei2010

回复 3# iseeyou1210 ) |3 K% N+ Q" G$ ?( C) U

9 X. u) E- i% J' [Remove the supernatant and re-suspend the cells in 10.0 ml SFM (without EGF and FGF) containing 15.0% dimethyl-sulfoxide (DMSO).
: Z3 h: H% q! V, s1 ~( xNeurosphere viability can also be enhanced by the addition of 20% fetal bovine serum (FBS) to the freezing medium. However, keep in mind that FBS will induce differentiation，谢谢你的文章

savid888

大家好！我看文献说神经干细胞的冻存液大多都是用DMEM/F12，胎牛血清和二甲基亚砜（比例分别为70%，20%，10 ..." d/ t- ?) E, ]9 [' q
huangfei2010 发表于 2010-5-19 09:48

" j" ]/ X# `9 S

2 _) y: \6 @8 I3 f! N( E% o神经干冻存时还是多用serum-free培养基吧？我们就这样用的，但是复苏成活率确实比较低
& \4 d8 S' M. l+ h: t# x+ V5 p9 @: |你说的文献是哪篇文献呐？

huangfei2010

回复 7# savid888
1 `, n4 s/ V% |6 O/ y1 X, `  q7 y; x7 h3 r

+ z: w2 s3 N  @5 v' K    文章发上来，你看下，能把你的冻存方法和相应文献也传上来吗，谢谢

savid888

我们冻存方法沿用师兄师姐的做法，没有文献呢。4 T0 _  ]: l3 G$ V1 H
培养神经干用的无血清培养基+10% DMSO，梯度降温冻存

meirongwan

可以用全胎牛血请加dmso复苏更好