绵羊类胚胎干细胞克隆及特性分析

冰冰凉

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【英文题名】 Cloning and Characterization of Ovine Embryonic Stem-like Cells # g5 q3 L, k% G3 C* A% |  d
【作者中文名】 王建锋;   i- p- ~6 n+ I& V. v+ d3 S
【导师】 赵兴绪; 张勇; % C: J% S) o& @% S. k! B6 i
【学位授予单位】 甘肃农业大学;
) J4 v; o5 y3 }6 G1 D& ^  ~【学科专业名称】 临床兽医学
( _9 V. \0 a  G【学位年度】 2007
. w9 ]/ J+ s3 A! X5 @/ L+ U  a5 {【论文级别】 硕士 ( C+ Y1 o( H, @* u2 @) u
【网络出版投稿人】 甘肃农业大学   q& M' J( \& A3 ?- L/ G  v# O% g
【网络出版投稿时间】 2007-12-18 * x+ r# E9 z/ u8 ~" C5 ?
【关键词】 绵羊; 卵母细胞; 体外成熟; 体外受精; 类胚胎干细胞; 小鼠胎儿成纤维细胞;
5 W6 ~( u3 p" K% @6 O1 W& M【英文关键词】 Ewe; Ovine; In vitro maturation; In vitro fertilization; Embryo stem-like cell; Mouse embryo fibroblast;
8 W" ?) D7 \3 K% r【中文摘要】 胚胎干细胞来源于着床前的囊胚内细胞团或早期胎儿的原始生殖细胞,具有全能分化和无限增殖的潜力。在适当条件下,胚胎干细胞可被诱导分化为各种细胞组织,这一特性使其在基础研究、移植治疗和基因治疗中具有诱人的应用前景。本研究从绵羊体外受精获得桑椹胚,用13.5日龄的小鼠胎儿成纤维细胞作为饲养层,分离培养绵羊类胚胎干细胞。目的在于探讨绵羊胚胎干细胞系的建立方法。通过研究,我们获得了如下结果。 1、通过对13.5天小鼠的胎儿进行胚胎成纤维细胞的分离培养,成功地建立了小鼠胎儿成纤维细胞饲养层(MEF)的制作方法,所制作的饲养层细胞形态正常,具有良好的生存能力。 2、在所建立的MEF饲养层上,以绵羊早期胚胎为材料,分离克隆到鸟巢状绵羊类ES细胞集落。绵羊类ES细胞AKP染色为阳性,表明绵羊类ES细胞表面存在AKP的表达。 3、从屠宰场获得卵巢,用剖切法可以显著提高卵母细胞的利用率,获得的A,B级卵母细胞数显著高于抽吸法(p<0.05),而抽吸法获得的C级卵母细胞数显著高于剖切法(p<0.05)。剖切法获得的卵母细胞体外成熟率显著高于抽吸法(p<0.05);而卵母细胞成熟后体外受精率两种采卵方法... * k/ _4 d/ t  n; R- k7 ?
【英文摘要】 Embryonic stem cell could be obtained from inner cell mass of preimplanted blastocyst or from primordial germ cells of the early embryos, with the capacity of unlimited growth and differentiation potential. Embryonic stem cell (ESc) can differentiate into different kinds of cells and organs under proper condition, and therefore has attractive prospect in basic research, transplantation and gene therapy. In current research, the morula was obtained from fertilized ovine oocytes that matured in vitro. m... # }) T0 E. J) g0 J# T0 d
【DOI】 CNKI:CDMD:2.2007.136319 # u' q2 i7 M& _2 ?$ _% v
【相同导师文献】 [1] 马友记.两种猪源病毒基因图谱绘制及分子免疫研究[D]. 甘肃农业大学,2006' b# u% ]; _2 ]/ [& t8 E
[2] 王建锋.绵羊类胚胎干细胞克隆及特性分析[D]. 甘肃农业大学,2007# q/ W. Z5 X) M, x: t- H
[3] 张建辉.绵羊朊蛋白等位基因多态性的研究[D]. 甘肃农业大学,2006+ L0 j8 r/ L' @9 H- @; N4 a, ^2 c
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感谢楼主

friendly0722

谢谢楼主，家畜方面的胚胎干细胞研究还需要更多的研究。