脂肪组织来源的干细胞的困惑

yuangaoqian

做脂肪来源的干细胞有3年了，可是越做发现越迷茫，希望各位老师给予指点。
+ z" _3 v1 U) r# j7 U7 c5 V1、我们用DMEM+10%FBS（四季青）培养基培养大鼠脂肪基质细胞，根据好多文献中说的，这种细胞呈成纤维样生长，多次传代后，细胞形态不会有太大的变化，但我们做的经过3次以上传代，细胞形态就明显发生了变化，并且细胞内出现了许多空泡，不知道是血清的问题还是其他的原因。
/ g- H8 ^( ^- P  f( z2、分离脂肪间充质细胞的过程中，我们根据文献中报道的方法，去除可见的血管，但是还会存在一些血管来源的细胞，如血管内皮细胞和造血干细胞，我们考虑过用流式细胞仪筛选或通过免疫磁珠筛选进行纯化，但一个是费钱，再就是获得的细胞数量很少，不知道该怎么办。

cjhpumc

第一个问题：血清必须得换进口的，即使进口的血清批次之间也会存在差异，所以需要在碰到合适的批次血清时多买点存着。( X/ C+ v7 `& p! ]& |" Q' T
第二个问题：间充质干细胞的培养几十年过去了，目前主要还是以贴壁筛选为主流，混杂的血细胞和内皮细胞什么的传过几次代之后都会去掉了

yuangaoqian

不过传代次数多了，细胞的形态会发生变化，不知道还是不是保持了原有细胞的特性。