《专题讨论贴》mouse ES cell 无饲养层细胞的 培养专题

上海过客

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/ j2 Y; ^( J8 ]0 e建议是否能够开个 mouse  ES cell   无饲养层细胞的 培养专题？( |8 R" K. y5 h( V: b

" ]! @+ @) j$ f9 t5 ^如果养 细胞的  饲养层当然是  没有一点问题 。
) ?! Y: e( i" ^. h( N) a0 h" O
0 h. D# {/ b$ P( t' {2 u' N但是如果是   毒力实验，或者   通路研究  ，两种细胞混杂 就 不能做了 。3 g/ i% e! E2 U

( G2 }0 c: G+ v( m2 b7 O" ]建议 以下 方面
4 Z9 `0 O9 D+ D* q3 Q# W: L, Z5 W, K8 _9 e+ p- b$ J9 n# }7 W$ s3 j
1   无饲养层  ES  细胞的  品系 差异 ？  iPS  无饲养层 培养？& E+ i3 T" d( @" U% R/ f# E
2    有饲养层 培养的ES 细胞的 驯化 问题  。& c3 l) E: G3 P$ z/ U! L/ r
3    培养基 的 问题 ，用什么 样的培养基 8 Z6 e! U3 c+ _! a7 [4 C& v
4  最重要的问题，无饲养层 的细胞  形态 和 基因表达 是不是和 有饲养层的相同。" B6 p# t9 Z! ]8 p1 |, }
     我现在看到的 文献里的无饲养层培养 ES 细胞 都惨不忍睹 。

上海过客

这里  是 一个  驯化的  实验流程

上海过客

我已经 feeder  free  传了 7代了 ，还是有分化的细胞 。: o! d% c  N  v7 U5 Z  R
7 Q% |9 y) _$ X) f1 W
但是 克隆的状态还是挺好的 。

上海过客

我想请问一下，feeder free的mESC状态跟有feeder的一样吗？也是那种很圆的球形克隆吗，为什么有的资料上说是 ...
! ^+ }. k& s* Qesc123esc 发表于 2010-6-24 12:09

7 u  V, L6 I  x
1 o! W& p. g. [: ]# R

0 C* ?) l& E) ~, ~( a* b$ R目前 看到 有一篇文献的  克隆很相似 。其他 的 都没有分化细胞，但是 状态和 MEF 培养的 状态 差 很远 。

上海过客

有可能请 养过 D3 feeder free  细胞的同学上个照片看看 。