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〔摘要〕 目的 探索大鼠脂肪组织来源的间充质干细胞(ADMSCs) 向心肌细胞定向诱导分化的细胞特征。方法
4 f, C% O- h3 Y胰酶消化法分离出ADMSCs , 对培养第3 代细胞分别进行HE 染色和CD44 免疫细胞化学染色, 利用光镜和激光共聚焦扫7 e, ~2 R$ A, T: `+ Z3 |& _
描显微镜观察其细胞特征和CD44 的表达; 5 - 氮杂胞苷(52aza) 诱导, 应用肌球蛋白重链(MHC) 抗体进行免疫细胞化
7 p3 @! k$ [( i$ _& Y4 P8 G ^学染色, 鉴定分化后的心肌样细胞; 利用免疫组织化学观察脂肪组织中CD44 阳性细胞的表达分布。结果 大鼠脂肪组织
9 V3 M9 b2 u% _3 I3 {0 Z) F分离的细胞生长迅速, 培养后分为两类: 一类为大型细胞, 其数量较多、体积较大; 另一类为小型细胞, 其数量较少、体) {# X# i) S) e l# d
积较小。免疫细胞化学和激光共聚焦显微镜观察显示大细胞呈CD44 弱阳性反应, 小细胞呈强阳性反应。52aza 诱导后, 发6 D1 \& ^* M' \$ ?2 n8 G, V
现7 处细胞团明显分化为心肌样细胞, 肌球蛋白呈强阳性反应。HE 染色显示呈典型的心肌细胞的特征。脂肪组织中CD44
, S9 E8 s- o9 t6 o$ {7 o阳性细胞位于脂肪小叶之间, 数量较少, 形态较小。结论 培养的大鼠脂肪组织来源的ADMSCs 分为大、小两类, 小型细5 i/ A; Z9 p8 _$ V
胞可能具有较强的分化为心肌样细胞的能力。 |
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