大鼠骨髓间充质干细胞要做流式鉴定，该怎样准备细胞？ - 间充质干细胞专区干细胞之家

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helenkim

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楼主

发表于 2010-8-2 15:29 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我养的是大鼠骨髓间充质干细胞，现在传代细胞长势不错，想要做流式MSC鉴定，不知细胞如何准备？是冻存还是最好直接做？有高手不吝赐教！谢谢！

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wsrz

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沙发

发表于 2010-8-4 15:03 |只看该作者

帮顶，也想学习

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lchanlon

版主

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藤椅

发表于 2010-8-4 15:14 |只看该作者

将培养的细胞冻存一部分。其余传代。胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液。用体积分数为2%牛血清白蛋白的PBS液冲洗细胞，室温下分别与CD29-PE，CD34-PE，CD44-PE，CD45-PE及CD105-PE单克隆抗体等避光孵育15 min。PBS液冲洗细胞，离心，弃上清。加入含10 g/L多聚甲醛的PBS液0.2 mL，使用同型对照单克隆抗体确定背景标记，流式细胞仪分析标记细胞。