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奇怪,神经干细胞消化后传代后细胞都消失了?(附图)   [复制链接]

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优秀会员 金话筒

楼主
发表于 2010-11-4 23:17 |显示全部帖子
最关键的一点绝对不能在胰酶中吹打细胞的。只有细胞碎片就是这个原因。
: D4 V7 ^) L. r" V我一般把含细胞的培养基取出,离心1000转5分钟,完全弃上清,加入胰酶加EDTA消化,孵箱孵育30分钟,每隔10分钟左右可取出震荡摇匀。10%的胎牛血清终止消化,1000r/5min,弃上清,培养基漂洗2次,再加入干细胞的培养基吹打15次左右,基本都是单细胞,分瓶培养。
$ @& ?! x( Q4 @/ }0 o2 x一直效果很好的。至于那一点残留的血清,根本达不到干细胞分化的程度。
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沙发
发表于 2010-11-4 23:21 |显示全部帖子
回复 9# xfyang2007123
) e8 G7 r  O& k/ o1 a2 w) W- ]1 S7 e
) _/ L3 r% R+ B7 K5 P# u- e; [如果是想半量换液,将含细胞的培养基离心后,上清全部取出后,在种细胞加入一半新鲜培养基一半旧的即可。
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