都说无菌操作要这严格那规范——大家不妨晒晒自己的豪放操作吧！也给新手们打打气

deron

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# K' j1 l, G' D& L$ h2 H6 U! @# D& A半年多细胞养下来，我们一致认为养女人比养细胞简单多了，起码她们不会动不动就死给你看。。。# k$ S. Y& m) P& R% ]5 `
开个玩笑，都说万事开头难，不过跟细胞混熟彼此了解以后，就可以很随意了。# Y" S& D3 Z: Z0 v
1.进出实验室一套白大褂不带换的，经常出去买个饭，回来接着进无菌室。
7 ~. h1 \& Z+ Y/ m. R2 Y3 L3 d! l2.不戴手套，喷点75%的酒精就上台了。* u- a; f  _0 l. @2 k6 X4 D/ o
3.师妹一次换液烧瓶口的时候突然酒精灯蹿火了，她下意识往瓶口那儿一吹，火焰立下就灭了……不过后来细胞也没事儿（特技效果慎勿模仿）5 d3 [1 Y7 ?: H7 @( Q) J8 {/ I
4.冻存细胞不经程控降温直接从4度扔进-80冰箱6 H. `) Q- f4 G. H, |: i
5.帽子口罩爱戴不戴! Y4 A6 N1 u. i* R6 i# e5 N
6.兴起时穿着休闲的衣服，进无菌室往手上喷点酒精，打开培养箱，捏着瓶口就上显微镜观察
* H9 L# W- w  u6 O7.胰酶血清直接扔进40度水浴化着，有时候化开好一会儿了才记起来。
: b4 c4 W- \+ u; D; Z- q4 ]8.培养基和缓冲盐溶液直接扔到台子上照紫外。
1 x& D7 }. g2 V) `9.急用器械又来不及灭菌的时候，拿个小铁碗倒点酒精进去，扔进器械点上火烧一小会儿就行。
7 K& |0 }( F7 u1 T10.组织块“吧唧”掉台子上了，夹起来用缓冲液冲冲接着用。$ V4 B% o. e8 t, h& N1 R# b
11.有一阵子酒精灯坏了，就只开着风机“裸”操作，居然没有问题。
1 g- W# L+ r& P  o得到的几个结论——帽子口罩手套白大褂不是保护细胞是保护自己用的；无菌室无菌台本身的洁净远比几个酒精灯火焰来得实在；很多东西你晓得成分原理之后自然能够游刃有余天不怕地不怕了。& z- J0 T8 F3 A1 T
也惨过，右手有三四个月一直处于无毛的荒芜状态，细胞有两个月就是不给你好形态看，有一次给所有细胞换液时搞错了培养基结果差点一个月心血全流掉~~~
- F6 L- ~! `$ y& x$ g9 A话说实验室一大姐大级别的人物第一次给96孔板换液的时候把板子从超净台里拿出来，华丽丽的往垃圾桶里一甩，接着又一甩……结果染菌了
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/ Q2 g( V, R6 ]: b! B/ C也不能毫无章法，个人以为三个必须的原则：0 a- c0 E/ f7 Q3 Y" U3 l( _3 w
1.操作必须保证在超净台深处，移液管等与细胞直接接触的物品一定要悬空不可与台面接触。5 {3 W$ c8 v" m% |5 ~
2.实验前的30min紫外消毒很有必要。
9 J2 X3 m0 J- N5 l3.操作结束后彻底清理实验垃圾。" c2 r/ d/ G1 H; ?' A
4.培养箱定期消毒（最好有一个记录本），无菌室定期清扫（除尘）。
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私底下还是很得意自己的细胞操作技术，染菌率在1%以下

ambassador

的确够豪放！不是一般熟练的操作员是做不来的~哎~中国这个盛产熟练工的地方~

zx19851985

凡人勿模仿~

chuanbaozang

呵呵，其实每个实验员都在不经意间走进了豪放的行列

anxjs

1、2、5、6、9，以前我们经常这么干，后来开始搞ESC和iPS，我们所长怕我们污染代价太大，强烈禁止了。8、10、11偶有发生。% _, y3 T# ^& A* Z4 E% M! R% T
有几次赶时间，细胞换液时直接拿培养基瓶子往细胞培养瓶里倒，结果当然没事。1 }' t$ Q' M( A( R" J) M# p$ D
说说我小师妹，刚进实验室那会，有次给细胞换液，由于细胞较多，叫小师妹帮我把先换好的细胞放进培养箱，结果第二天发现有两瓶被她神差鬼使的放进了冰箱，拿回孵箱继续培养，和其他的没什么两样，细胞为MSC，估计要是ESC就要分化掉了。
+ {2 v" i( Q, O' q2 K7 }还有次细胞消化离心，小师妹兴冲冲的拿去配平，结果把配平用的水加到细胞那管去了。搞得我直接收工回去了。
4 {% H2 W8 B; ]! L( `3 \新手刚进实验室，还是要盯着，不然很容易犯些不可思议的低级错误，恩，可能是high过头了。

deron

回复 5# anxjs
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    哈哈，其实新手也可以给很多启示滴。好多自己习以为常的习惯经常被人刨根问底地问及到原理时才发现，基础不是那么扎实——也可以弥补自己的体系漏洞

淡定

12567经常的，现在还是穿大褂操作了毕竟还是要保护好自己

wjy1597

这也要鼓励嘛？

shewawa

呵呵，很佩服那位大姐大级别的我也想试试。我最搞笑的一次是，dish被contamination了居然不知道（因为细胞还好好的），还给老师欣赏了下我的大个iPS，后来被老师嘲笑那是霉菌感染，结果全incubator大检查，霉菌一大堆，真个incubator都out了……

透明微笑

不敢豪放，不豪放都出错。