请问拟胚体是自发形成的吗？

zhaoyan1983

请问拟胚体是自发形成的还是加入什么化学试剂诱导后形成的？

lgstemcell

ESC在任何失去平面生长的条件下，例如：悬浮培养状态下，会自发形成拟胚体。一般不需要加任何化学试剂，除非拟需要在早起启动分化时进行干预诱导其向特定胚层分化。

juan880929

拟胚体的形成是自发分化的。干细胞的培养需要加入抑制其分化的物质，如果去除这些抑制分化的物质以后，干细胞就会自发分化形成拟胚体。比如小鼠的胚胎干细胞去除lif后细胞就会自发分化形成有三陪曾的拟胚体，培养天数多了还会形成跳动的心肌细胞。拟胚体的形成可以是悬浮培养法或者贴壁培养法。

zhaoyan1983

悬浮培养和悬滴培养是一个意思吗？在什么情况下用贴壁 什么情况下用悬浮，请指教！

coralqin

不是一个意思。EB悬浮培养是ES细胞消化后将细胞悬液直接接种到petri dish(细菌培养皿)中，自发分化形成的，形成的EB随着培养的进行其大小、形态、发育分化程度都存在一定的差异性；而悬滴培养是在ES细胞消化后通过计数，将含有一定量ES的细胞悬液（200个/20ul）接种在培养皿的盖子上，待3d左右EB成形后再转入悬浮培养。这样形成的EB球其大小、形态、发育分化程度都比较接近。如果你所做的实验要求比较精确的控制EB的发育时程，建议采用悬滴培养。这也是我们投稿SCI期刊reviewer的意见之一。

illidancui

谢谢楼上，学习了。
6 i& N, M0 k! U/ D. I之前看相关文献一直很纳闷。

瑟瑟狼

一般情况下，一个克隆被从板上挑下来之后，传代的话就被传到包被明胶，铺有feeder的板上；0 K0 H$ Z9 h* Z
如果用国产的皿，不作处理，直接将克隆放在里边加上ES培养基配样，他就不能贴壁。两三天之后，自发形成拟胚体，配样约五天左右，可以看到明显囊胚样结构（空心小球）。  O& S- ]8 X" _
+ H$ P- Q8 J3 [' R1 m: t
这里用的是国产皿质量差，使细胞不易贴壁的性质。

zhaonicholas

那为什么我看文献很多人是用维甲酸诱导EB的形成啊？？不是还有EB培养基吗？本人刚接触这方面的信息所以不是很熟，还望高人指点一二。

573639471

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