请教iPS诱导过程中的问题（有图）

cicadacjk

我觉得问题基本可以圈定以下几个：
0 x; r  ^" S1 k+ Q0 p1. 你的293或者MEF有支原体污染，feeder变差就是这个原因，支原体存在基本上是做不出iPS的，必须除去（这个应该是主要原因，其他两个是附加建议）
2 a+ I7 X( u9 e- S1 L% J0 t, l4 F3 _" P2. 你用的MEF代数太老了，一般三代以内，P2更好。# E) \. f3 Q: y9 {5 D/ c
3. PMX诱导，你附加了什么包装质粒，如果滴度高，六天四因子感染的MEF会长得满盘都是，所以包装质粒，转染技术可能都要提升。

cicadacjk

支原体极有可能在你的293T细胞上，这样你的病毒就带支原体4 h+ _( ^  d: H6 C, M
带了Myc的细胞自然长势良好，只是你这个也不能算长势良好，只是能活能分裂罢了，要不然六天必然密到堆起来。如果有支原体是没有办法的，必须换细胞。不要幻想能除去支原体。3 g( `& z9 o/ R5 ^. i1 H: X0 V- t
人的细胞代数大点没问题的，十代左右也就中等效率吧。MEF P4基本不行了。
/ l0 E9 B! s. s9 M你ES培养基是用FBS吧，没有用KSR吧？一般来说就是用15%的FBS养。
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; X' N. i/ q, ]" Z  f建议去找株干净的platE细胞，实在不行找一株干净的293，估计问题就能解决了。