请教培养瓶的问题！！！

zhaoyan1983

1.首先想确认一下是不是培养ES或iPS时，由始至终都要用明胶包被的培养瓶或培养皿进行培养？; l3 @4 o/ @6 m* ^9 I
2.买来的培养瓶是已经用明胶包被好的吗？' |7 B# l  [8 J/ @. H& s9 X
3.我看到过有人（貌似新手）做ES传代时，打开一包新的培养瓶直接进行了ES传代。请问这种做法应该是不对的吧？9 B: }) }/ f1 J1 C3 `% n, S  E

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  x+ e6 v0 o6 ?/ I2 s真心求教!期待解答！

懵懂干细胞

http://www.stemcell8.cn/viewthre ... hlight=%C3%F7%BD%BA$ h, M6 z7 w; h5 p3 [; s
海洋哥在这个有类似的问题！可以参考参考！7 a! p2 q2 X* i- p, Z
http://www.stemcell8.cn/viewthre ... hlight=%C3%F7%BD%BA
; y* F' T1 L- m) e, S) J2 Z$ E& \这个里面有个明胶处理全攻略！也可以参考参考！

zhaoyan1983

不是一回事儿啊 有没有谁回答一下啊

supergama

1、培养好ES，明胶包被是必要的，不包被细胞卷边、脱壁严重，这是无数次实验的结果，一定不要怀疑。9 O) a. [( [% @  [4 U( X
2、买来的培养瓶如常用的BD的或corning的，通常只作了TC处理，贵一点的有强微波等离子体处理的，能在一定程度上提高细胞的贴壁能力，但明胶包被依然重要。

lxl069

每次都要包被的

102795mimi

回复 4# supergama
- u5 b. k5 y3 I* [
; h+ t+ L" e) a, {* @' U. r6 Y
3 v) e$ f6 y: A. N, P    1   请问，我如果是培养组织里面的干细胞，比如肺干细胞啊或者间充质干细胞啊，还用明胶处理吗？
9 ^/ r1 D3 ]* s  L: ^   2   一般什么情况下明胶处理？: ?- Q3 r$ q& J1 I9 O/ V0 |6 `" x
   3   现在一般培养比较成熟的干细胞中，哪些需要明胶处理？

supergama

回复 6# 102795mimi : o3 z1 }8 x$ n1 f8 Q: n9 z! K6 f1 G
是否铺明胶具体问题要具体分析的。像MSC的培养我们通常是在原代时铺明胶而传代时不再铺明胶。因为原代铺明胶有利于细胞尽快适应体外培养环境，而传代时不再铺明胶更有利于杂细胞的去除。而像ES特别是人的ES因为一代间隔时间较长（3-5天）这时处理过的MEF贴壁能力下降在没有明胶包被时会很容易脱落。而像神经干和某些肿瘤干需要悬浮成球培养时当然不需要明胶包被了。

102795mimi

回复 7# supergama " l: A; V; |" S- Q1 w: R9 ?) ^
- E+ V5 z' t6 J  v/ w0 c
$ t+ {" I$ ^6 G# U- C) {2 R
    谢谢，不过我们养的RAT的MSC从没明胶包被过，你觉得包与不包影响很大吗

supergama

回复 8# 102795mimi - }; k& T* g, @2 ^+ h
影响不大

xiaoma402716390

我感觉是否铺明胶具体问题要具体分析的。比如MSC的培养通常是在原代时铺明胶而传代时不再需铺明胶。因为原代时铺明胶有利于细胞快速适应体外培养环境，而传代时不再铺明胶有利于去除杂细胞。但像ES特别是人的ES因为一代间隔时间较长（通常3-5天）这时处理过的MEF贴壁能力下降，它在没有明胶包被时会很容易脱落。而像神经干细胞和某些肿瘤干细胞需要悬浮成球培养时就不需要明胶包被了。