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zhangyuwei55

新手上路

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楼主

发表于 2010-10-10 14:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

有哪位高人指点下利用酶消化法培养间充质干细胞？

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沙发

发表于 2010-10-10 15:02 |只看该作者

间充质干细胞会随着传代次数的增加而变得越来越难消化，因为越往后养，分化增加，生长也变得缓慢，贴壁越牢。我一般在前四代使用0.05%胰酶进行消化，效果很好。之后就比较难消化，即使在37下也可能长达5分钟，所以可以考虑增加胰酶的浓度。

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daviddow

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藤椅

发表于 2010-10-10 20:58 |只看该作者

0.1%胶原酶1个小时

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chuanbaozang

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板凳

发表于 2010-10-11 08:43 |只看该作者

我们是用胶原酶和胰酶分两步对间充质干细胞进行消化的，然后进行原代培养。太粘稠了，可以考虑用DNaseI来处理一下

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hawkyiger

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发表于 2010-10-11 09:14 |只看该作者

阿弥陀佛，自己看去吧

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qianqianlaile

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地板

发表于 2010-10-11 16:18 |只看该作者

也有用胶原酶和中性蛋白酶联合消化的

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kqyy

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7楼

发表于 2010-10-12 00:13 |只看该作者

没有这么夸张吧，我加了EDTA的基本消化70秒，不用吹，轻轻摇细胞就下来了。

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zhangyuwei55

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8楼

发表于 2010-10-15 10:50 |只看该作者

胶原酶什么类型呢？还有浓度？
谢谢，嘿嘿

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zhangyuwei55

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9楼

发表于 2010-10-15 10:54 |只看该作者

本帖最后由 zhangyuwei55 于 2010-10-15 10:56 编辑

谢谢大家的指点不过想问的是用胶原酶1型好？消化多久为佳的？

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