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楼主

发表于 2010-10-14 16:45 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

猪的ES和iPS传代，需要将克隆分割成小块进行传代，应该如何操作？怎样做才能保证消化后形成的是细胞团而不是单细胞呢？最好有步骤！谢谢

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优秀会员金话筒

沙发

发表于 2010-10-15 08:18 |只看该作者

应该用胶原酶四消化，从镜下观察啊，待集落的边缘卷起后即可停止消化，用1ml枪吸培养液在培养皿上轻轻的滑，即可将集落滑成小块。

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痞子的烟头

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藤椅

发表于 2010-10-15 08:26 |只看该作者

如果你不怕麻烦，可以镜下将克隆化线，一般我们实验室就只是采用DISPASE消化，作用柔和，楼上的兄弟说的也是可以

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板凳

发表于 2010-10-15 18:13 |只看该作者

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invtrogin有专门的工具，像一个刮子，纵横各刮一次就不克隆切成大小一致的小块了

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报纸

发表于 2010-10-15 18:23 |只看该作者

不知道呢，还是学习下！

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地板

发表于 2010-10-19 19:58 |只看该作者

最好还是用机械切割的方法,如果用酶消化不合适的话,可能会导致克隆分化,所以用针将克隆挑出后需要用口吸管针吹吸多次后,离心用枪吹打,可分散为单细胞

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