我是RT-PCR新手 请教一个有关随机引物方面的问题

zhaoyan1983

1.只是看其中一个目的基因的表达情况不一定要将全长P出来，只是P一个片段就可以
4 Z/ X! R) }& I  E" q1 c& U2.如果是想要完整的DNA片段 不妨将几个DNA片段连接在一起# d" A( N, b1 y  Q
3. 你的片段太长 RT的话 可能P不出来 到时很难确定到底是没有转录 还是因为片段太长所以没P出来
! H' L1 N) }  r; L0 z/ y8 z: O( P4 q4.随机引物就是包含了所有碱基组合的引物（如八聚体的随机引物有4的8次方中序列的引物在里面），RNA加热后变成单链的线性状，这时再降低温度退火（0度），引物就跟RNA配对结合了，然后在40多度的环境下由逆转录酶合成与RNA互补的另一条链，这样就得到cDNA了。之后你再以cDNA为模板 以你设计的引物进行PCR 。" N& p- R2 p" ?* h

' N( a) |  R, W+ ~1 ~% M0 v& ?我感觉应该是这么回事 请大家批评指正！