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电穿孔和脂质体转染效率都不算高吧。推荐使用慢病毒载体,论坛里面有专门的干细胞转染区。% {- e1 R% B8 |1 s
简要介绍下:慢病毒载体是一种复制缺陷型逆转录病毒载体,源于人免疫缺陷病毒(HIV),其基因组为RNA,并携带逆转录酶和重组酶,因此可以将病毒基因组逆转录成DNA,并随机插入转染细胞基因组。
, p. f# F7 u0 w由于慢病毒载体可以将目的基因插入转染细胞的染色体,又由于慢病毒载体对干细胞等分裂细胞的转染效率明显高于其他基因载体,而整合至细胞染色体中的目的基因又可以随着细胞的分裂而扩增,因此表达效率不会因为转染细胞分裂后,目的基因逐渐被稀释而减弱。因此,慢病毒载体主要用于遗传病的基因治疗等需要目的基因长期表达的情况。另外,在实验研究中,慢病毒载体广泛由于干细胞转基因研究,同时也是建立表达目的基因细胞系的有效工具。 |
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