贴壁神经神经干的诱导分化

jennyshy

有谁贴壁培养人的神经干细胞
# c' ]% U# w0 p- u. w8 r5 i2 s( K# t0 ^) }" h, n
最近诱导贴壁培养的人的神经干细胞分化，用ply-Lys 包被的皿6 f" m' D5 U) P4 u  c- E" O
培养基去除生长因子，加1μM 视磺酸（RA）诱导分化7d0 w2 ?3 f) u8 I/ j9 A- N

# x/ U6 B/ v$ V/ J但是结果却让人郁闷：细胞由双极突变成细长状，有多死细胞，并没有看到典型的神经细胞样的结构1 W1 U& J0 W- {+ c6 O1 d$ V
现在排除染菌和试剂等问题。
+ r2 e3 o9 j. T( Z请教大家如何解决。

lhmxm

我也做过，感觉RA的效果没有文献上说的那么明显

lhmxm

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" R2 W- d& ~0 z) t( T4 `* m- T' V
请问你是怎么用PLL包被的，包被时间多久，包被后立刻就洗还是等干烘干了以后再洗，具体的步骤可以说下吗？

lhmxm

回复 lhmxm 的帖子- G/ G/ f* d4 P! r" K' A' ]4 X* @

" I' ^& b5 D% [: j: V6 X确实，我也用过，感觉不到明显的作用

jennyshy

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, z% ^2 O' ?& E3 }6 S7 ]% Y- H" d* m$ ?+ b; F
0.1mg/mL包被，可以过滤用3-4次
( L2 G: p( L. c% \, J3 Y37度或者室温过夜% h" a3 N9 \8 `0 m0 L
吸掉PLL后，不用烘干，PBS洗3次，晾干( u- K9 t1 j& E0 O- [) Z% i

2008xiao

我也准备用RA诱导神经干细胞分化，请问楼上几位RA该怎么溶解呢？用什么做溶剂？不敢随便用，怕影响细胞。多谢了！

lhmxm

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) @( X$ T: P1 O0 a9 N0 [; _
要用DMSO来溶