成纤维细胞长成这个样子～～

wangzhuo822001

( p0 u" |7 A0 t; B
0 ]8 u" u2 C: m" u
前天杀毒12.5天的小鼠，取的成纤维细胞，居然成了这个样子，这是f0代，还没有传代，请大家帮忙看看，是什么原因呢？
& W) u. G$ F! b4 `' I  我觉得细胞的胞核好大，颗粒很多，而且形状很不好～～8 u( s9 d+ P/ `! q( U/ O7 j0 N  E
  附上各种倍数的图片：
: D! M* A+ w: d0 ~' r/ R  培养了有3天时间了，培养基没有浑浊，培养基的ph、培养箱的温度那些都应该没有问题，培养基里面原先是加了1%的双抗的，会是污染么？

zheng19791221

养成上皮细胞了，成纤维很少。需要重做

ruofan1982

你1：多少传代的啊？
( A: l9 P  ~4 G4 n9 _4 w; G这个密度我看要1：4传。密度比较高

随风的天使

看了感觉细胞纯度不够高。很像我做小鼠成纤维原代时的上皮细胞的感觉。但是这种细胞在后期传代培养时就慢慢纯化掉了。

wangzhuo822001

回复 5# jhu132llh ! Z+ d0 w6 ~7 l/ y2 o9 |
我传了两次代，细胞都长得还是这个样子～～是不是我一直都是细胞太多了？这样的细胞还能用么？？

xiaodiao123

感觉细胞密度很大，而且觉得照的好像不是很清楚。我以前养过3T3，是小鼠的胚胎成纤维细胞

wangzhuo822001

晚上传代了，主要是觉得细胞长得都不想成纤维了，以前也有密度大的时候，但是感觉都不是这个样子～～这是是如图的块状的细胞，以前还是梭形的～～这是ICR小鼠的～

cony

传代，密度不要太大

w1986725

是什么来源的MEF?那一条条的是什么?感觉好像是密度太大

jhu132llh

看出来了+ b( J, H) |; C5 v  G
应该不是污染: [3 g! U( M) r5 c
是细胞内的脂滴过多并且出现大的脂滴泡，
# d, Y, ~# Z4 k凋亡细胞的一部分特征。, C0 ^* H; t) E& i
考虑改进一下：
8 h6 w% a' V  d4 g 1.换液可以稍微频繁点
8 }" r6 }2 F' y6 ?! k9 I7 o9 h 2.换个没加抗生素的media培养试试4 j1 S7 H. l  e' H' N
3.也有可能是细胞纯度不够% t( d* A. {: d. H) q4 E8 V# I
4.有时候，传代也能解决很多的问题的，你试试传代