求助：骨髓间充质干细胞复苏

yaqingqing

我养的是大鼠骨髓间充质干细胞，P3冻存，复苏至T75 flask中，可是复苏后的细胞都3天了，贴壁的特别的少，很多细胞都悬浮着，不知道怎么回事。  y! P) [4 U+ g: z% i
请各位高手帮帮忙！！

yaqingqing

回复 3# zx19851985 + p* {0 }( y" m
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    谢谢你的关注！！
# i! H$ x! s9 d1 z    冻存液我是按我们实验室的基本经验DMSO:完全培养基=1:9配制的。融化时间不超过60s的。复苏后24小时后我观察贴壁细胞较少，就没有换液，想等等看的。

yaqingqing

回复 4# 皮搋子
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% I: Q3 R% l7 m) D- \/ G- R1 B: p    非常感谢你的建议！！$ v( G0 I7 V3 e
    我现在隐约觉得可能是我复苏时的细胞浓度太低而对他的生长有影响，但不确定。所以我会再复苏一支。

yaqingqing

回复 5# 痞子的烟头
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$ g, S- r9 t1 L8 k    感谢你的回复！！) a% l) G3 X( I. d6 Q
    我想请问这个血清和DMSO添加一定要有顺序吗？如果有，应该是怎样的顺序呢？2 M% U' j5 U  D$ f
    谢谢！！

yaqingqing

回复 10# 若兰汀
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. @3 K/ n! b$ X. v2 Y  i' J    非常感谢你的关注！！7 {4 n3 x4 z  c+ P: o4 w; v& F
    我冻存时细胞的汇合率是大于90%的，但冻存液中的血清浓度只有15%左右。我是在T75 flask中复苏的。