求助：骨髓间充质干细胞复苏

皮搋子

细胞冻存与复苏：
3 j% ~8 g( Z& l0 r# g8 x* A& r      冻存：选择细胞状态最好时冻存，冻存液10%DMSO，30%血清，60%培养液，最好是配好了放于4度，待温度降为4度后再用于重悬细胞。而后用包布包好，放于-20冰箱2h，再-80过夜，从包布中取出放于液氮中。
- t9 b9 H  b. F; L1 \      这样能够保证细胞有较高的存活率。/ i, r2 y6 B" a/ f
      复苏：准备好37-40度水浴，将细胞从液氮中取出，迅速置于水浴中不断晃动，待全部融化后取出，准备一支离心管加2-3ml培养液，将细胞加入混匀后1000rpm离心5min，弃上清，完全培养液重悬。# U5 o3 j& z5 O, }2 J) y: h
     这样操作对复苏细胞来说条件比较温和。
: Q/ Y* V+ r; Z/ g/ O( ?      如果你复苏的操作没问题，那问题一定是出在冻存上。不过有时候也会出现这样的怪现象，一批冻存的细胞有的复苏效果就很好，有的就像你说的不贴壁。不贴壁的问题应该是出现在瓶子上，可能是这个不好的瓶子就被你赶上了！' v- n. Z* j( c7 f( P
      建议你在复苏一支试试，如果在正确的操作下还是不贴壁，这一批细胞很可能就都不能用了。