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今天早上去看我的细胞,长得满满的,心情那个好!
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本来打算马上传代的,可我的器械瓶瓶管管还没消毒,正好大师姐打电话来说今天有几台大手术要我回科室帮下忙。+ }- }# `7 z- _/ k
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! M5 z$ v( ? @一看已经变黄的培养液,我好担心手术下午完了我细胞会胀死的,反复问了老师和同学,说几个小时没事的,才安心的走出实验室。7 q7 o Q1 ~% y+ w# _* p
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下午3点半,终于完手术了,拿着刚消好毒的宝贝,乐滋滋的到了实验室,顾不上疲劳,常规消毒工作台,然后开始& S' R, c! u* I3 H b
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第一次做传代,也不懂,一个实验室的同学先给自己的细胞传代演示给我看了,一步步的详细的给我讲解,以及一些地方可能会犯的错误直接导致实验结果等。% o; B, Y @9 p- C
4 B8 T( I+ O! A我还是像模像样的坐下,有意思的是,我这同学让我传三瓶,另一个实验室的一个同学呢让我传四瓶,为这他们争执了起来。
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看他们争得面红耳赤的,我那方都不好得罪,只好听天由命了,我打开盒子,里面刚好有四个培养瓶,(废话,我自己打的包我当然清楚里面是多少个瓶子,但当面反对别人,肯定以后都没人敢帮我了,嘿嘿,想想自己挺阴险的!
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- c* m" g( T7 ^- t所以那个师兄也让步了,就既然这样干脆就传四瓶嘛!(其实我也想传四瓶,因为这样细胞多点,我多冻存点以后用着也宽心。)
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2 b& @6 a/ Q3 z2 j+ g先把变得淡黄的培养液倒掉,加入1毫升胰酶消化,37度孵育30秒钟。镜下看,细胞间隙不是太大,师兄说还要4 V1 p# F0 s, q4 s
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消化一会,时间不够,因为他自己的细胞消化时间为1分钟。晕死今天实验笔记放车上了,所以当时也忘记我的HELA到底消化时间5 J4 n8 d- c% L9 Y( S2 s7 x
/ W- o" Q9 @5 ^5 k$ X7 b是多少,本来想找网上的朋友求助的,但想想时间不待,我依希记得,我的HELA消化时间为1-5分钟,可那师兄
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说一般就1分钟,我也没有反驳的理由,所以就在那么几么几的,师兄说快别看了,赶紧中止消化吧,呆会消化过头了。
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* g3 ?8 l/ |, l3 [+ K* g0 m哦,于是加了1毫升10%小牛血清配的培养基,倒掉,注意我这里说的这个倒掉,可能规范,正确的应该是用吸管: }- l$ r6 D1 R+ X
. w4 m9 i4 k" T8 q' q# ~8 @: l吸出来,但我师兄说如果操作好还是可以直接倒的,省事。9 y+ ]( p* n" L7 z3 C
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再加7毫升培养基,反复吹打1分钟的样子,镜下看,好多成团状的细胞,贴壁的倒是比较少了,再吹打1分钟,# v& W" a' V5 J( `7 x, @. _
( t' C$ M1 n. v) x/ m# _4 c1 g9 a镜下再看,没有很明显的成团状细胞,YEAH!0 {9 i n% l0 D& a
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开始分装,先再4个培养瓶里各加2毫升培养基,再分别依次分装,师兄叫我加的时候滴管要悬空,我当时也忘记问为什么了
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只是心里想,悬空的话这么高的下去,我的细胞摔死了怎么办,心里怎么想的就怎么说了出来,可想不到笑死在场的人了8 ~7 Y6 N& _. {. J, S R0 |
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后来仔细想想觉得自己可够无知加白痴的!% Z3 {) w. P& p1 Z# c3 b8 k
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大概详细情况就是这样!累死了难得写了。
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也不知道这个帖子能给我加多少分! |
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