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今天早上去看我的细胞,长得满满的,心情那个好!
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: [4 v* U4 y% b本来打算马上传代的,可我的器械瓶瓶管管还没消毒,正好大师姐打电话来说今天有几台大手术要我回科室帮下忙。! t r- @# Q: `8 r9 @
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一看已经变黄的培养液,我好担心手术下午完了我细胞会胀死的,反复问了老师和同学,说几个小时没事的,才安心的走出实验室。
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下午3点半,终于完手术了,拿着刚消好毒的宝贝,乐滋滋的到了实验室,顾不上疲劳,常规消毒工作台,然后开始
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* ?( J# \: t. ]1 w% i7 {第一次做传代,也不懂,一个实验室的同学先给自己的细胞传代演示给我看了,一步步的详细的给我讲解,以及一些地方可能会犯的错误直接导致实验结果等。* ^ \9 m" V1 L& h% C3 q
9 y2 u6 q; Q' R9 ^$ N* |# p: Q' z1 x我还是像模像样的坐下,有意思的是,我这同学让我传三瓶,另一个实验室的一个同学呢让我传四瓶,为这他们争执了起来。
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/ u/ o+ p G7 |4 U7 |8 F看他们争得面红耳赤的,我那方都不好得罪,只好听天由命了,我打开盒子,里面刚好有四个培养瓶,(废话,我自己打的包我当然清楚里面是多少个瓶子,但当面反对别人,肯定以后都没人敢帮我了,嘿嘿,想想自己挺阴险的!& G6 s4 } G# w: j3 r' r( d4 p, `! w! S
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* k D$ f A/ V所以那个师兄也让步了,就既然这样干脆就传四瓶嘛!(其实我也想传四瓶,因为这样细胞多点,我多冻存点以后用着也宽心。) L3 ^0 U; ?1 `: Y% ~ j: D
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# _3 M& A2 ^/ ^) J$ k9 y' |9 Y先把变得淡黄的培养液倒掉,加入1毫升胰酶消化,37度孵育30秒钟。镜下看,细胞间隙不是太大,师兄说还要
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消化一会,时间不够,因为他自己的细胞消化时间为1分钟。晕死今天实验笔记放车上了,所以当时也忘记我的HELA到底消化时间3 ^5 ^) o4 ?) H G+ z
3 k& C! A! K+ f2 |4 ]是多少,本来想找网上的朋友求助的,但想想时间不待,我依希记得,我的HELA消化时间为1-5分钟,可那师兄
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K1 k- }. m5 B; A4 N0 P* K说一般就1分钟,我也没有反驳的理由,所以就在那么几么几的,师兄说快别看了,赶紧中止消化吧,呆会消化过头了。6 w. W+ r% H( k/ }0 |9 J
" R' u. A- C7 k) i; t) K! r哦,于是加了1毫升10%小牛血清配的培养基,倒掉,注意我这里说的这个倒掉,可能规范,正确的应该是用吸管
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吸出来,但我师兄说如果操作好还是可以直接倒的,省事。
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再加7毫升培养基,反复吹打1分钟的样子,镜下看,好多成团状的细胞,贴壁的倒是比较少了,再吹打1分钟,7 e& F+ y1 u L" d) @
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镜下再看,没有很明显的成团状细胞,YEAH!! u; q S3 g7 m1 @7 b w5 g
# r( n% S& [" d开始分装,先再4个培养瓶里各加2毫升培养基,再分别依次分装,师兄叫我加的时候滴管要悬空,我当时也忘记问为什么了7 C) Y5 E4 C5 b, ?) J! a
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只是心里想,悬空的话这么高的下去,我的细胞摔死了怎么办,心里怎么想的就怎么说了出来,可想不到笑死在场的人了4 M" F9 C3 F6 T9 w5 n
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后来仔细想想觉得自己可够无知加白痴的!9 B/ E% O8 L6 N4 Z
9 d; `2 ]* O5 `大概详细情况就是这样!累死了难得写了。
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也不知道这个帖子能给我加多少分! |
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