有没有人做过用慢病毒转染ips细胞的

王乾

1，选择合适的病毒载体和包装质粒
( }& g" Z4 t3 f# M2，传代293T，10cm的皿500万细胞，传代后12-16小时转染，每种质粒我一般转5-10ug，最好用钙转。, F, t1 U& W3 K  A% f- Q1 n# D
3，6-8小时换液
9 I, L# D  C4 Z( x0 [! O4，换液后36-48小时收病毒，尽量避免培养基发黄。滴度一般怎么也能到10^6。5 \- D  j. @, P* K( \$ u1 A
5，感染前6小时传ES，我一般一个六孔板的一个空传2万个细胞。/ s, d' ~6 D; }- c# ^8 l
6，感染，轻轻吸掉ES的培养基，换成病毒液，加入polybrane。
( `* j' g6 J, g0 J4 Z( H7,8-12小时换掉病毒液，72小时后测流式。