间充质干细胞培养遇到的奇怪现象，求解！！！！

2006goodluck

大家好，我培养的间充质干细胞在传代后第一、二天都长得很好，可是到了第三天再看已经伸展开的细胞又缩了回去，变成了高亮的圆形。我已经传了三代（P6-P8）了（别人送的一只细胞）每一代都有这样的问题,变圆的细胞我都扔了，但是每一代都会遇到这样的问题，到底问题出在哪里了？请大家帮忙分析一下

andyz0922

严重怀疑 操作问题

南飞的艳子

估计是老化了，我也遇到过这种情况，前两天看好好的，再次看的时候细胞都变圆了，而且脱落混在培养基中，感觉像污染一样，其实是老化了，你可以把它再次传代，但密度要稀试一下，可以挽回一些细胞

sijicc

1 你的细胞是别人给的，你现在使用的培养液和这个细胞以前使用的培养液是否一样？
& x4 |5 y2 R% t5 p9 r4 Y: w2 胰酶消化一定要小心，胰酶浓度和消化时间需要严格控制+ N2 `' h# f# z, T- _5 J* Q
3 接种密度没有必要1:2 或者1:4传代，按照密度传更科学

joeandanna

回复 9# gaorongbest / i. W: g" _1 w. a' V& x0 _: m
你现在在养吗？可以借给我传个代吗？谢谢 非常感谢

gaorongbest

不知你养的是什么间充质, 但间充质应该叫好养,可以传到十几代呢,长得也很快!

gaorongbest

应该是细胞长过了,老化即将死亡了吧,到这个阶段时,细胞形态立体感就不强了,变得平圆,细胞边缘不清晰,活性不好,我也遇到这样的问题,细胞今天看很好,次日就老化了!

daviddow

是不是凋亡的细胞？按说密度低的MSC是不会凋亡的。

stemcell8

是不是胰酶没除净啊 ？

wjc1975

可能是细胞增殖过快，接触抑制后死亡