干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
朗日生物

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 13426|回复: 5
go

[请教] 有关wnt通路的实验设计 [复制链接]

Rank: 1

积分
35 
威望
35  
包包
528  
楼主
发表于 2010-11-24 07:40 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
我做的是与wnt信号通路有关的,想了解某种药物诱导成骨是否和wnt信号通路有关,如果加药后β-catenin,LEF、CyclinD增加可否说明wnt信号通路被激活?β-catenin用的是western blot方法测定核内的,LEF、CyclinD用的是PCR的方法,这样设计实验合理吗?各位高手请帮帮忙,谢谢!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 7Rank: 7Rank: 7

积分
1133 
威望
1133  
包包
4372  

小小研究员 热心会员 积极份子 优秀会员 优秀版主 名家 新闻小组成员

沙发
发表于 2010-11-24 08:31 |只看该作者
加药后β-catenin,LEF、CyclinD增加不能说明wnt信号通路被激活,因为还有其他能激活β-catenin,LEF、CyclinD通路,像GSK通路,所以你应该补加一个实验:检测GSK的KNOCK DOWN后,磷酸化GSK的量。你后面问题不具体,而且不知道你做什么相关试验,没法判断,不过catenin的蛋白提法不一样的话,你western结果也会差很多。。。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 10 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 10  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 1

积分
35 
威望
35  
包包
528  
藤椅
发表于 2010-11-24 21:52 |只看该作者
GSK通路?不是很明白,版主可否提供相关文献?GSK不是导致β-catenin降解的蛋白复合体组成成分之一吗?

Rank: 1

积分
35 
威望
35  
包包
528  
板凳
发表于 2010-11-29 19:42 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
自己顶一下

Rank: 2

积分
128 
威望
128  
包包
919  
报纸
发表于 2010-11-30 08:46 |只看该作者
本帖最后由 yangjie0329 于 2010-11-30 08:47 编辑 + z' S9 s3 s) i2 N& J# e4 N# ~$ ]
- p2 l% g0 |0 s# X
GSK3 beta也属于WNT信号通路里的呀,所以应该把它再加上,再加个RUNX2
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
209 
威望
209  
包包
31  
地板
发表于 2010-11-30 17:41 |只看该作者
回复 lpf19851105 的帖子/ {9 a2 ?. J; p; ~" y0 w
+ Z/ H( ^% \4 ?) z
建议同时检测Wnt信号的经典和非经典两条通路, 以及两种途径之间的相互作用
  D) T) V8 J9 y2 }* ?, B+ S* ~9 B最好是能通过organ culture, 然后采用切片免疫组织化学和原位杂交的验证方法
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 5   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2025-6-7 00:08

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.