大肠杆菌4度能保存多久？还能不能用于摇菌？

sidalin301

大肠杆菌4度能保存多久？还能不能用于摇菌？0 X$ T7 C+ ?' q! f
我做过一次质粒的小抽，小抽之前分装了一些菌液保存在了4度，放了挺久的，如果我这次再要提取质粒，能不能把上述菌液拿来复苏、涂板、扩增？
5 {. f4 _# H0 u3 M1 R我这样做是想省事一些，下次提取质粒时不用再从感受态做起，直接就可以进行后面的实验。
( u, ]# f/ K! f" ]  Q0 Z请有经验的同道指点一下，先表示感谢！

zhaoyan1983

吸上清就行 我试过放一年呢 基本上没什么问题
  V6 Y  i; ~/ c
5 K4 p( J2 f' Z但是如果你的菌活性不好的话 就另当别论了

zuming

我是没这么试过的。; ?# j& h& N1 D( r. R! G+ Z
如果想放心的话还是从保种的里面复苏一管好了，做实验很重要的一条就是要确保每一步都没问题。这样到最后如果实验结果不理想的话便于分析。不至于到最后找原因的时候搞不清楚哪一步出问题了。

sidalin301

回复 2# zhaoyan1983 4 G/ C' y  a% e
* z3 R& V; |, S0 |# n8 K

' v% W( {0 j- A" C2 d( v    吸上清怎么可以呢？我发现EP管底有白色沉淀，估计就是细菌，上清里面怎么有细菌呢？

绿雪

放多久了呢？如果不放心就用接种环沾取一点，划线，第二天挑单克隆，再扩大培养就行了。

sidalin301

可是我取一些放在含抗生素的平板培养时什么都没有

zhaoyan1983

回复  zhaoyan1983 : Y7 R) x$ Y; @& F% L
/ l- t% u* e5 f) R, v) e

' p/ Y* S6 A7 x* _! I. u    吸上清怎么可以呢？我发现EP管底有白色沉淀，估计就是细菌，上清里面怎么有细 ...
. m7 i8 N" x2 }0 ^& @8 }* Rsidalin301 发表于 2010-11-24 14:38

) c$ z" ~* ^+ I6 u
- a9 G$ y9 k3 W7 D1 K7 [
沉淀的是死细菌 活着的还在上清里呢

痞子的烟头

可以用的，但记住加抗生素

sidalin301

谢谢各位的指点了！

cigoo

没有加甘油，我的放一个多月活力就不太好了。但还能涨的出来。
4 a" _0 z* r( W3 k# Y涂板子的时候多吸点就行。50ul试试。, i4 T! s" ]" m( K7 m; c
划线的话，先用枪吹吹在做，画的快速点也能长出单菌