求助：细胞复苏问题

hawkyiger

建议按楼上的试试，省去离心步骤，直接加完全培养基培养（如果不放心的话可以加的多一点，在低浓度下冻存保护剂对细胞损伤不大），然后次天换液，祝你好运

andyz0922

先将冻存的细胞 加入 20%血清 培养基 中 培养 0 j- x3 f9 T2 J7 G2 |( [
- w' y% Y2 H* u8 \* m, }! {
待细胞贴壁后 及时换液  这样细胞估计就会多些了 ) R- u: P' l/ b8 o; I
; C% U" A2 f5 y, Z8 B  S3 w
不妨 试一试  因为你的细胞数少一定是你在接种前 的操作问题
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6 R3 l* l  {# ~1 I+ Y不是 吹打 就是 离心   这样做一次 若还是少的话 就无奈了

蛮蛮1984

也有可能是细胞本来就有问题

蛮蛮1984

是不是解冻的速度不够快，时间太长，最好是在水浴里一分钟之内解冻

shiqingxi

要是实在吹不散 怀疑你的细胞冻存前就不好，细胞死了才会有团块的。

2006goodluck

吹打的次数多一些，但只要温和一些，对细胞的机械损伤应该不是很大

luoye1986

谢谢各位前辈的指导！! z" I" q! Z. g+ F, v4 J
我准备再按照正确的方法试试。
( j1 z$ x* |8 n, P: ~# q' E: E+ I' t
* [0 i" J1 W5 O7 b! r# |还有个问题，多大的转速比较好呢？有朋友告诉我说 ...
8 V2 Y8 [  [/ I8 q/ Q/ Pcherrydeng2006 发表于 2010-11-26 13:35

, b+ f# s* u/ e; v
8 {$ s" s* Z& Q0 F7 l/ x& r% K- R3 X% y  q2 d
    无血清培养基不是完全培养基不影响复苏效果

luoye1986

对，吹打次数太多对本来就刚复苏的细胞造成了机械损伤，而且离心速度是不是偏低了些，我们通常都是1200-1500 rpm的