求助：细胞复苏问题

hawkyiger

建议按楼上的试试，省去离心步骤，直接加完全培养基培养（如果不放心的话可以加的多一点，在低浓度下冻存保护剂对细胞损伤不大），然后次天换液，祝你好运

andyz0922

先将冻存的细胞 加入 20%血清 培养基 中 培养
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- i8 b/ V6 W7 S2 q9 n, s待细胞贴壁后 及时换液  这样细胞估计就会多些了 7 B; z" A  O' d1 _" Q! g4 {3 @

5 _* b# |& @' x& l% K8 e不妨 试一试  因为你的细胞数少一定是你在接种前 的操作问题
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不是 吹打 就是 离心   这样做一次 若还是少的话 就无奈了

蛮蛮1984

也有可能是细胞本来就有问题

蛮蛮1984

是不是解冻的速度不够快，时间太长，最好是在水浴里一分钟之内解冻

shiqingxi

要是实在吹不散 怀疑你的细胞冻存前就不好，细胞死了才会有团块的。

2006goodluck

吹打的次数多一些，但只要温和一些，对细胞的机械损伤应该不是很大

luoye1986

谢谢各位前辈的指导！
) S6 D& y- M; {- k/ I/ R我准备再按照正确的方法试试。
# s8 \+ p- H5 ^9 y7 L8 o8 R
1 d4 f+ [1 s* z, C还有个问题，多大的转速比较好呢？有朋友告诉我说 ...
! t" p* U0 _% _" r; m# k( Vcherrydeng2006 发表于 2010-11-26 13:35

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1 p. E" q% z2 M$ A! E
    无血清培养基不是完全培养基不影响复苏效果

luoye1986

对，吹打次数太多对本来就刚复苏的细胞造成了机械损伤，而且离心速度是不是偏低了些，我们通常都是1200-1500 rpm的