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间充干的鉴定 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2010-11-25 15:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
SD大鼠BMSC的鉴定,需要哪些标记物?内皮祖细胞呢?
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小小研究员

沙发
发表于 2010-11-25 18:02 |只看该作者
搜索一下这个板块有很多这方面的帖子

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小小研究员

藤椅
发表于 2010-11-25 18:04 |只看该作者

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帅哥研究员

板凳
发表于 2010-11-26 14:23 |只看该作者
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通常是CD29                CD73                CD90                CD105                CD106                CD166                CD34                CD45                CD14                CD79α                HLA-Ⅱ
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报纸
发表于 2010-12-28 12:55 |只看该作者
将培养的细胞冻存一部分。其余传代。胰蛋白酶消化,制成单细胞悬液。用体积分数为2%牛血清白蛋白的PBS液冲洗细胞,室温下分别与CD29-PE,CD34-PE,CD44-PE,CD45-PE及CD105-PE单克隆抗体等避光孵育15 min。PBS液冲洗细胞,离心,弃上清。加入含10 g/L多聚甲醛的PBS液0.2 mL,使用同型对照单克隆抗体确定背景标记,流式细胞仪分析标记细胞。9 O/ Z4 L. T# E" r; m$ p3 i

1 P& {, a( K+ W5 t鉴定MSC的最低标准(这是国际标准):(1)细胞形态成纤维状,体外生长具有塑料粘附性(2)至少表达基质细胞标志CD73和CD105同时不表达造血标志CD14,CD34,CD45(3)具有分化潜能。
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地板
发表于 2010-12-29 09:04 |只看该作者
回复 色色兔 的帖子3 ]+ \4 n4 V+ d+ L

* v; A4 A# U8 `* Y5 G' P  g$ d胰酶消化细胞会产生非特异性吸附吧!每次PBS洗几遍?3遍?离心是1100rpm,4度,5min?开始细胞量要求多少?最后检测时还可以剩余多少?
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