如何解决神经干细胞球贴壁的问题？

xfyang2007123

如题，我养的神经干细胞原代就很容易贴壁，培养基应该没什么大问题（DMEM/f12）加EGF，bFGF,B27,胰岛素，肝素钠，葡萄糖！每培养瓶中加约7ml培养液（25cm培养瓶）。下面是几幅在无血清培养基中贴壁的细胞照片！

xfyang2007123

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0 N3 P2 S' W- K( h: @" d5 i+ T  P' m% j$ \; z0 \0 Y
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leedh1223

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dilal

可以采用超低吸附的培养板

xfyang2007123

回复 dilal 的帖子5 Y$ C! W5 A" n& N- s

( ]4 o5 J( h  |' }请问你们是用的什么牌子的培养瓶呢？谢谢。货号是多少？

dilal

回复 xfyang2007123 的帖子0 a& Y( K$ {, w2 Q7 s+ X
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我是做胚胎干细胞的，超低吸附的培养瓶我不清楚，你可以上网查查。我最近买了一批Corning公司的超低吸附培养板，不过还没用，不知道效果如何，据说是可以降低细胞吸附的。
+ C  z' `, S7 z! W6 M; x我也只是一个建议，你可以想想其他的办法，比如用琼脂糖或Polyhema铺板等。

smkx

: D% Y3 Y& K. X4 A

8 c# C9 F3 ~, J. S不知道是何种物种，成体还是胎儿？我做的是胎鼠的神经球培养，用24孔板和小皿培养出现贴壁，用6孔板则很少贴壁。贴壁与否和培养皿关系很大。

xfyang2007123

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我做的是大鼠的胚胎神经干细胞。贴壁的细胞用无血清培养竟然长的还不错，估计是星形胶质细胞或少突胶质细胞了。

jennyshy

这种情况我在开始养的时候也出现过，尝试换过超低吸附的培养皿，不过后来发现用普通培养皿也照样不贴了。所以一直在想不错为什么？3 k6 R, Q6 y7 q" C  a3 S
现在估计可能是在原代分离时的问题。胎鼠的胎龄，分离的手法等等，还有就是培养基的问题，生长因子可能不够用了
; k5 t0 ^2 V2 d, v( }2 G2 k  z我觉得不像是星形胶质细胞，因为它可以传代，少突胶质细胞形态上又不太像: S' ]  b. F% G3 C& i
倒像是贴壁长的神经干细胞，它有明显的双极突而没有神经细胞的分支。. ]. U% G1 g  s: I
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个人意见

xfyang2007123

回复 jennyshy 的帖子) T4 X4 ~4 e" }" J8 Q1 r1 M& y& Y8 p
3 P& `1 w* [" i' T
你好！照片中央是神经干细胞球的贴壁部分，外周是贴壁后出现的细胞，我还没有鉴定是什么细胞，不过我用的都是无血清培养基，贴壁生长的神经干细胞生命力不知有没有这么强！我把贴壁的细胞养了一下，用的也是无血清培养基，长的还挺好，可以传代，估计是胶质细胞之类的，改天我把贴壁长的细胞照片发过来大家看看，呵呵！