请问取新生大鼠的海马怎么取比较准确点

青萍红檀

求具体一点的操作步骤，万分感谢！

李玉桃

l)取新生24h以内的SD大鼠，放入玻璃培养皿中，用75%酒精喷洒消毒，放1 B! m& m, u' ~0 ]
入超净台;
6 k! S) ]# a/ j5 B, q* K2)用酒精棉球全身消毒，用手术剪断头，眼科剪从椎管纵向剪开颅骨，再颅顶0 Y" `( \  ~8 a7 w1 [6 d! C
横向剪一刀。暴露两侧大脑半球，用小弯镊翻出大脑，放入冰冷的无钙镁8 l0 A7 t0 B" H8 }1 d7 F
HBSS;B7 x# _: ]8 ?" N, ^7 T1 [
3)剪去小脑及嗅球部分，沿中线分开两个大脑半球，置于解剖显微镜下取海马;
& v+ l& k$ Y% @. Q3 H$ {4）用两把纤维镊分离脑干，完全去除脑膜，分离皮层组织，即可见弯月形的海
; b$ ^( }4 k+ t6 g, P* x- T一马，镜下去除微血管，将海马置于冰冷的另外一个HBSS培养皿中;
; ?3 V9 k3 i( j& R" b5）收集所有海马组织后，用弯剪剪碎海马为lmm3大小，用吸管转移至15m!7 b) ~: t' {$ @6 ^$ D2 k- f+ j
离心管中;9 _! C+ ~) D" J2 _
6）加入同体积的预热的0.25%EDTA一胰蛋白酶溶液，使终浓度为0.125%，置于37oC水浴15min，每5min轻摇l次;加入lml冰冷的FBS终止消化在冰上静置5min，吸弃上清，用HBSS洗3次;- _7 _! c) G. W$ p
7）加入预热的种植液2ml，用玻璃滴管轻轻反复吹打10余次，避免产生气泡，
, L1 b' U# D9 U% v再换用细口径滴管反复吹打一10余次，静置5min，吸取上清到新的50ml离$ k0 D% G: m4 i( x, ?, y2 K% N- I  Z
心管中;9 T$ V$ w+ J4 O$ \/ u

青萍红檀

非常感谢指导，但是要是能提供图片就更形象点咯

jennyshy

乳鼠的海马很容易分辨的，李玉桃的方法很好
, c  N* V3 ?9 }0 g" N/ ^* L0 o+ g站内有小鼠神经干的培养视频，你可以找找看看

青萍红檀

我就是看不成视频咯，级别低了，受限，呵呵

jialan

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2 M8 v5 ]( d' ?# _+ f. a& g3 y* }4 U4 t5 w( c! W: C/ l$ P9 b
说得好详细，肯定是位高手，我现在刚开始做乳鼠海马神经干细胞的培养，解剖镜下怎样取海马呢？我取了几次都没看到海马在哪里？

421087176

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8 `0 ?9 _! t/ A" z7 @# a9 J6 B谢谢你！

李1二

回复 李玉桃 的帖子- G; m! C: B/ ?  S- f

5 E, g, D3 A) [1 `8 S) E; I我看过的最详细的步骤  太谢谢了