请问取新生大鼠的海马怎么取比较准确点

青萍红檀

求具体一点的操作步骤，万分感谢！

李玉桃

l)取新生24h以内的SD大鼠，放入玻璃培养皿中，用75%酒精喷洒消毒，放
) x" F) k) l# I入超净台;/ V! {# D" ]- A$ }
2)用酒精棉球全身消毒，用手术剪断头，眼科剪从椎管纵向剪开颅骨，再颅顶1 y5 H2 K; U; [% O' m" r- i
横向剪一刀。暴露两侧大脑半球，用小弯镊翻出大脑，放入冰冷的无钙镁0 s0 v9 V* I7 C3 h
HBSS;B: j* {' }( ?. o6 \
3)剪去小脑及嗅球部分，沿中线分开两个大脑半球，置于解剖显微镜下取海马;# O0 A7 D2 K( e0 J+ f$ n8 v0 J/ u
4）用两把纤维镊分离脑干，完全去除脑膜，分离皮层组织，即可见弯月形的海
4 A8 [* M9 H% Y# o2 Z) g/ o8 w一马，镜下去除微血管，将海马置于冰冷的另外一个HBSS培养皿中;" @8 t: z& B/ X4 p% ~
5）收集所有海马组织后，用弯剪剪碎海马为lmm3大小，用吸管转移至15m!+ X: [9 k& p" \) V
离心管中;  f6 ^/ u) ^" f9 |  }0 R; Y* Y
6）加入同体积的预热的0.25%EDTA一胰蛋白酶溶液，使终浓度为0.125%，置于37oC水浴15min，每5min轻摇l次;加入lml冰冷的FBS终止消化在冰上静置5min，吸弃上清，用HBSS洗3次;
" u; |8 M; j2 |' ~3 C$ W7）加入预热的种植液2ml，用玻璃滴管轻轻反复吹打10余次，避免产生气泡，" `) H7 ^5 U: Q" h4 u3 c3 m. O
再换用细口径滴管反复吹打一10余次，静置5min，吸取上清到新的50ml离, J2 h4 @. h- n8 m* S* C0 C- L
心管中;1 G9 L7 i2 B# Y$ a% Q

青萍红檀

非常感谢指导，但是要是能提供图片就更形象点咯

jennyshy

乳鼠的海马很容易分辨的，李玉桃的方法很好$ U' x. R1 T  e
站内有小鼠神经干的培养视频，你可以找找看看

青萍红檀

我就是看不成视频咯，级别低了，受限，呵呵

jialan

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) l9 P: l  V4 `* j
* O6 d8 U. L) n3 A说得好详细，肯定是位高手，我现在刚开始做乳鼠海马神经干细胞的培养，解剖镜下怎样取海马呢？我取了几次都没看到海马在哪里？

421087176

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  g7 V. t: |$ ^0 R: i5 |5 C: B* w
  d- A7 A) m6 i4 Q4 X8 N/ t谢谢你！

李1二

回复 李玉桃 的帖子9 g) ~# v0 v8 V8 o; r

/ H8 ]1 N2 q# }+ G" }9 b我看过的最详细的步骤  太谢谢了