分选肿瘤干细胞到底是用流式还是磁珠好？

jamquit

本来一直是准备用流式的，之前也在坛子里见过讨论，我要做肝癌干细胞，准备买抗体了，可是一个师兄建议我用磁珠，一个试剂商也说如果分选了之后要继续养的话用磁珠比较好 我分选之后肯定是要继续培养的 准备用单抗 到底用什么分选好呢？用流式对细胞的损伤到底有多大？求高手指点。。。

daviddow

2个都一样，别听卖试剂的瞎扯。而且，磁珠的试剂也很贵，好像8000一个抗体。说不定让你买磁石，还得1万。
9 v; X5 f8 G1 W# y% B* P如果你用一个marker，其实磁珠也可以。不过要是几个，我建议用流式细胞术。

sanhuo

磁珠分选获得细胞数目大，速度快。流式分选纯度高，但太费时! x2 ~3 O$ P$ w" r" d
看你自己实验条件
, x7 E$ G0 o' K1 ^/ W都是可以的

hanchao

磁珠是挂着珠子 分选后 洗掉即可，流式抗体检测，荧光会一直联在细胞上，随着传代，或时间淬灭。流式分选对细胞损伤大。分选后成活率还成问题。

mckf111

回复 hanchao 的帖子. E9 \0 B0 A( V: m8 U% o

6 T( S3 v8 R0 y7 |! k! T同意

jamquit

6 P+ `7 U' p+ W) o4 j& f
1 c' J5 S% W6 A* v回复 daviddow 的帖子
4 c( y0 @  Z  ^
5 {; r9 `# a% E谢谢回答~~~我联系了下美天旎的代理商 他们现在好像搞活动买抗体送磁柱 不过要一万左右 还是很贵呀 我目前准备的是一个marker 不过想和老板商量下再用一个marker 那流式对细胞的活性影响不大么？用流式选后的细胞再培养没问题吧。。。

jamquit

回复 sanhuo 的帖子1 e, q; z& p2 F3 j

( J$ L7 ]$ `: x谢谢回答~~~就是说磁珠分选的纯度得不到保证？

jamquit

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, f" V3 \: w$ P1 z谢谢回答~~~这样看的话还是磁珠比较好吧 毕竟还要继续培养。。。
# _0 c7 H' v" r" w那如果用流式 有什么办法可以提高存活率呢？？

jamquit

谢谢以上各位高手的回答~~~以后还要多向各位学习哈~~~

xiaoma402716390

用磁珠分选后干细胞可以继续培养，就是磁珠有点贵75%折后还要九千多，好像现在搞活动买磁珠分选柱，还有生长因子都是五折，我当时买的都是75%折。肝癌干细胞用CD133，我知道有人分选成功了。如果钱充足的话，还是用MACS好点。