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是不是原代培养时间太长,有损细胞活性 [复制链接]

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楼主
发表于 2010-12-14 13:14 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
     我上次培养大鼠的MSC时,为了得到较纯的成纤维状细胞,第一次换液在取材19小时后,由于换液太早,细胞密度太低,长了20天还不到传代标准,但是我师姐说细胞活性已经有所退还,再原代培养对细胞有害,我就传代了。我想请教各位大侠,一般原代培养多长时间就可以传代,原代培养时间过长是不是对细胞有害,细胞生长速率与接种密度由关系吗???谢谢了!!
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沙发
发表于 2010-12-14 13:59 |只看该作者
细胞增殖能力和接种密度有很大的关系,当细胞之间没有接触时,细胞很难长起来,这可能和细胞之间的一些信号转导相关
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藤椅
发表于 2010-12-14 14:49 |只看该作者
一般生长速度快的接种密度要小一些,生长速度慢的接种密度要大些,当然也因具体细胞而异!
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发表于 2010-12-14 17:34 |只看该作者
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本帖最后由 deron 于 2010-12-14 17:35 编辑 & |# u) S6 }! A+ [( ?. Q! ]

# p: a7 O  p* b& E0 H楼主养的是大鼠骨髓MSC吧?全血法贴壁?  A( V  _$ U" g2 A  X" x
为了使细胞有充分时间贴壁,我们通常放上3天以后再换液,想不明白早换液为什么对细胞不好。20天不到传代标准肯定是失败了。可以考虑增加一下起始的细胞量。
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报纸
发表于 2010-12-14 20:09 |只看该作者
回复 deron 的帖子
; f5 |% C5 u# ^5 c* }2 }5 C7 X8 i+ L+ [2 ]
我是采用全血贴壁法培养的大鼠BMSCs,我传代后看到细胞长的挺好的,也比较快,今天是P1代细胞培养的第七天,很快就可以传P2代了。我是不是应该把这次的细胞扔了,还是接着做后面的实验?
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地板
发表于 2010-12-15 09:53 |只看该作者
回复 bin 的帖子
4 s9 A0 ]# m/ i# p0 i8 t" V! ^" V6 O( [& y/ _
多数的细胞实验,通常看细胞形态,形态好可以保留。原代培养时间也会因鼠而异的,老鼠和老鼠的体质也有区别。
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发表于 2010-12-19 10:58 |只看该作者
谢谢各位大虾了!!!
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