关于使用病毒转染干细胞的问题

fordhuhudadad

各位前辈，老师，请教大家一个问题：小弟目前正在进行腺病毒、AAV和慢病毒转染干细胞的体外实验，不知道需要病毒的量，是否有这方面的宝贵经验，还望不吝赐教哦！

kostarcell

你的病毒是怎么来的？自己构建的还是外面构建好的？MOI是多少？

regene

慢病毒转染干细胞，MOI大概为10～20，即感染干细胞所需病毒的量为感染同样细胞数量293细胞的10～20倍。

kostarcell

: q" V3 \7 Z, }9 d
& a5 n* V% ^) _
http://wenku.baidu.com/view/0e4a0ed184254b35eefd3441.html     慢病毒使用手册

regene

回复 kostarcell 的帖子% |+ m' V6 l$ }: R8 ?- c
+ }& [  }9 b, K2 Q. ^" Q
恩，不错，贴到这吧 javascript:;

fordhuhudadad

回复 regene 的帖子. D2 X. R- y1 K1 d
& M# k& q4 u4 p' H
非常感谢regene前辈 雪中送炭 ！' Q' [1 p3 l* a
过去对 病毒载体转染干细胞这方面知识确实太欠缺了，非常感谢您的 手册！！

fordhuhudadad

回复 kostarcell 的帖子. x" g" x: C0 r8 Z
; K2 D$ D, x. g0 u
您好！ 非常感谢您的指导！ 我正是在准备使用商品化的EGFP慢病毒载体转染干细胞，作为示踪的。但慢病毒 生物安全方面 ，如果可能 请给予一些介绍！: u: {/ E0 _8 W0 f7 b
2 c; @( c, P- r# b( a5 A3 p9 S( N
非常感谢学长！

regene

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回复 fordhuhudadad 的帖子/ @! }- |3 p. V" f) @7 g6 I

5 W# b) v# G6 D# c不用客气～/ f  Y- G* H+ v7 i+ l) C" b
关于安全方面:
* b' S1 W) M3 C: F1.病毒操作时最好使用生物安全柜。如果使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开排风机。
' m; p$ Q& L, K2.病毒操作时请穿实验服，带口罩和手套。' ^3 e) i$ M4 z; G  N  Q+ [
3.操作病毒时特别小心不要产生气雾或飞溅。如果操作时超净工作台有病毒污染，请立即用70%乙醇加1%的SDS 溶液擦拭干净。接触过病毒的枪头，2 R, S. y% I4 I) V- a. I
离心管，培养板，培养液请于84 消毒液或1%SDS 中浸泡过夜后弃去。
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shanshuiweiwei

very good, much appreciated

syl1982

我们实验室 不让使用腺病毒，但是 还要用，注意安全啊，虽然毒性减了，但是。。。关于腺病毒可以参考[url]MYCN-regulated microRNAs repress estrogen receptor-{alpha} (ESR1) expression and neuronal differentiation in human neuroblastoma. 2010
- o( G( j/ m# b0 @ 这篇文献很新2010年的，很不错
+ D/ f' s) F* b) K1 U# z: i% S祝你好运、、、、