关于使用病毒转染干细胞的问题

fordhuhudadad

各位前辈，老师，请教大家一个问题：小弟目前正在进行腺病毒、AAV和慢病毒转染干细胞的体外实验，不知道需要病毒的量，是否有这方面的宝贵经验，还望不吝赐教哦！

kostarcell

你的病毒是怎么来的？自己构建的还是外面构建好的？MOI是多少？

regene

慢病毒转染干细胞，MOI大概为10～20，即感染干细胞所需病毒的量为感染同样细胞数量293细胞的10～20倍。

kostarcell

3 U8 P) V9 x3 T  Y- B, h
9 x' f% [/ Z: K1 M" Yhttp://wenku.baidu.com/view/0e4a0ed184254b35eefd3441.html     慢病毒使用手册

regene

回复 kostarcell 的帖子
( N. N% R: E6 D+ m
9 X: x9 a7 g+ M恩，不错，贴到这吧 javascript:;

fordhuhudadad

回复 regene 的帖子
4 \, v6 C( c) {. {8 c# U+ [9 }4 n! c- q" Q5 a, ?; y
非常感谢regene前辈 雪中送炭 ！
5 E6 N) i5 w, e$ t& g过去对 病毒载体转染干细胞这方面知识确实太欠缺了，非常感谢您的 手册！！

fordhuhudadad

回复 kostarcell 的帖子; t. E5 k' u( S5 V& L
) {& \; P# C: L. l% [) j2 Z
您好！ 非常感谢您的指导！ 我正是在准备使用商品化的EGFP慢病毒载体转染干细胞，作为示踪的。但慢病毒 生物安全方面 ，如果可能 请给予一些介绍！' O4 e5 {4 e$ n) A
9 A3 D, ]6 d9 _. [/ u, K: G
非常感谢学长！

regene

' j7 q$ h. j' D$ c
( ~# f$ B- t) P/ P
回复 fordhuhudadad 的帖子, G2 p% V- _4 E7 v0 [, G
  s! B, i+ M, K, H
不用客气～
: F. s7 M3 Q) c$ ?+ H/ ?& d1 A, O关于安全方面:
0 E7 ?. x2 \/ C9 A1.病毒操作时最好使用生物安全柜。如果使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开排风机。' [& K$ w% o2 Z, W; R
2.病毒操作时请穿实验服，带口罩和手套。
  J) k5 y6 K2 A8 Y3.操作病毒时特别小心不要产生气雾或飞溅。如果操作时超净工作台有病毒污染，请立即用70%乙醇加1%的SDS 溶液擦拭干净。接触过病毒的枪头，
! i8 [  j5 o2 W5 i$ \离心管，培养板，培养液请于84 消毒液或1%SDS 中浸泡过夜后弃去。
& G: y  P1 {. w! I; e5 ]

shanshuiweiwei

very good, much appreciated

syl1982

我们实验室 不让使用腺病毒，但是 还要用，注意安全啊，虽然毒性减了，但是。。。关于腺病毒可以参考[url]MYCN-regulated microRNAs repress estrogen receptor-{alpha} (ESR1) expression and neuronal differentiation in human neuroblastoma. 2010 ; U$ e, ]$ N! @7 T. E- y# E
这篇文献很新2010年的，很不错3 B- F( p- Y/ k2 y5 k
祝你好运、、、、