关于使用病毒转染干细胞的问题

fordhuhudadad

各位前辈，老师，请教大家一个问题：小弟目前正在进行腺病毒、AAV和慢病毒转染干细胞的体外实验，不知道需要病毒的量，是否有这方面的宝贵经验，还望不吝赐教哦！

kostarcell

你的病毒是怎么来的？自己构建的还是外面构建好的？MOI是多少？

regene

慢病毒转染干细胞，MOI大概为10～20，即感染干细胞所需病毒的量为感染同样细胞数量293细胞的10～20倍。

kostarcell

, a) C9 b( `3 W* D& Y& x

7 b6 Q1 z8 {) Hhttp://wenku.baidu.com/view/0e4a0ed184254b35eefd3441.html     慢病毒使用手册

regene

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- V: T6 ]! R# f% a7 ?5 c* F7 B! k/ z1 Z2 L. ]& j. ]( P
恩，不错，贴到这吧 javascript:;

fordhuhudadad

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! {; x& y' z& P# r4 I4 a. A3 s
( F' h" |: e* ]7 ]5 m非常感谢regene前辈 雪中送炭 ！
0 e( l) n0 y6 g1 i" V9 J) d  o过去对 病毒载体转染干细胞这方面知识确实太欠缺了，非常感谢您的 手册！！

fordhuhudadad

回复 kostarcell 的帖子, x  t) f6 ~6 ~1 ~0 G2 F

2 E$ b) M& q% ]2 o; K  |2 _. Z您好！ 非常感谢您的指导！ 我正是在准备使用商品化的EGFP慢病毒载体转染干细胞，作为示踪的。但慢病毒 生物安全方面 ，如果可能 请给予一些介绍！
0 o" K. G$ _$ |* R% V# K* n( ]2 N% _, n
非常感谢学长！

regene

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8 j, F. P7 h. u" v+ i: B
( B6 X/ j  {7 m& K% i: O4 D不用客气～4 u0 T# r! h* D: }+ x- N4 E4 C* T
关于安全方面:# V6 }( z/ G8 ~, V
1.病毒操作时最好使用生物安全柜。如果使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开排风机。' e' p* K8 t5 C& L8 [8 W
2.病毒操作时请穿实验服，带口罩和手套。
3 F$ j6 D6 g4 `1 h3.操作病毒时特别小心不要产生气雾或飞溅。如果操作时超净工作台有病毒污染，请立即用70%乙醇加1%的SDS 溶液擦拭干净。接触过病毒的枪头，
, X& `5 K: g! P) C# n离心管，培养板，培养液请于84 消毒液或1%SDS 中浸泡过夜后弃去。& N" p* |! z6 R5 O! w# r

shanshuiweiwei

very good, much appreciated

syl1982

我们实验室 不让使用腺病毒，但是 还要用，注意安全啊，虽然毒性减了，但是。。。关于腺病毒可以参考[url]MYCN-regulated microRNAs repress estrogen receptor-{alpha} (ESR1) expression and neuronal differentiation in human neuroblastoma. 2010
2 K" ^' v2 g* w, e$ F6 Q! P 这篇文献很新2010年的，很不错0 \- ?, S0 W, D, `& k! d' h" S
祝你好运、、、、