如何将细胞单克隆挑下来

zoe

在培养皿中的贴壁细胞，如何将细胞单克隆挑下来？

chliu

回复 zoe 的帖子" _$ y* n8 }; {" X4 a. d
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我们是先用PBS洗两次，加入PBS，在解剖镜下用20ul的枪头将单克隆整个挑起来，吸至枪头中，加入已经加好胰酶的96孔板中，用胰酶消化。

宗介

加胰酶用枪头吹

BIOLOGY

用玻璃针挑比较好，而且能吹的很散

bin

,看来这似乎是个难关耶。

bin

即将要用到的技术，还不会，谢谢各位了。

jhu132llh

这个在我们大实验室其他组倒是很容易
3 T, F' ^+ _0 y$ {) |& ?& H! G因为我们大实验室有做克隆的0 z& ^) x* z2 p2 ?5 a( O6 Y, v
所以) L! P; M) f: d. Z: O9 m" P$ B* N2 n8 ~
用遗传操作系统很容易就可以将细胞克隆吸出来，极度精确

future007

我见过两种，都是需要先在显微镜下用笔将克隆圈住。一种是用克隆杯，底部抹上凡士扣在画好的克隆处，用胰蛋白酶加到克隆杯里消化，在终止消化，最后吸出液体传代。另外一种就是直接用枪头反复划圈住的克隆的区域，用PBS轻轻地从皿的一侧冲洗。最后收集PBS液，直接传代到新的皿里，不要忘了补加细胞培养液。

BIOLOGY

体视镜下，把克隆用玻璃针管连着一段橡胶管做的口吸管吸出，胰酶消化，血清终止，种入新的皿中即可

siyue13

用克隆环