小鼠骨髓间充质干细胞P3变成成纤维细胞

feiyang

请教大家！我的小鼠骨髓间充质干细胞，从P3代开始就变成成纤维细胞。是不是开始细胞里就有成纤维细胞，成纤维细胞生命力很强，随着传代，成纤维细胞长起来，挤掉了MSC。我不知道怎么办？谢谢！

luoziwei

P3的MSC形状变粗变成纤维状，这个很正常，说明前面你分离纯化的时候细胞不够纯，不过一般就用P2-P3的做实验室。DMEM+血清培养，血清要好，即使形态发生改变，我提取的基因还能说明这些细胞还是具备一定的干细胞性状的。就看你要做什么实验了，请楼主勿忧。

vae有何不可

有可能是你分离原代组织细胞的时候 分选不完全 遗留在里边的 如果时间充分的话 可以考虑重新分选原代

若兰汀

间充质干细胞无论传几代都只可能是间充质干细胞，有人做过相关研究，脐带来源的P20都没有问题，只是其增殖能力、细胞形态以及表面标志表达强弱有改变。如果你确定P3出现成纤维细胞，那么初步确定你的原代以就存在杂细胞污染。一般做实验都选用P3代细胞，依据实验方向不同要求其达到不同的细胞纯度，譬如转分化或者特异性药物、微环境耐受等对纯度要求相对较高；如果要观察其移植以及归巢定位状态，一定要新鲜分离并注意其注射或植入方式。成纤维细胞的增殖能力如何尚待研究，但是如果MSCs是优势细胞群落，以其较强的增殖能力，应该不会出现“挤掉”这一情况。楼主要依据实验情况而定，如果对纯度要求较高，建议使用前上流式鉴定纯度，严格控制细胞质量，以免后续实验受到影响。祝实验顺利

feiyang

谢谢大家！！若兰汀所说的“如果要观察其移植以及归巢定位状态，一定要新鲜分离”，意思是细胞不能用冻存过的是吗？
6 c8 N) L$ g0 @1 i: J

liujucool

回复 vae有何不可 的帖子
3 f9 }' D! V9 K. S: `6 n" @* o  U5 M8 e& a
请教下原代培养时有什么好办法提纯吗  我们实验室采用的是全骨髓培养法 感觉P3后形态各异

ljzmy82

可以是冻存的细胞，只要是细胞纯就可以了
1 V8 [% L2 q( q, c

open1230

打算试试冻存！