关于condition medium的制备问题

开心果王

正在feeder free状态下培养hES，但是用一般的ES medium效果不怎么好，容易分化。文献上说是用condition medium较好。也请教过师兄，现在还想请教各位大侠：
0 ~: S3 p/ h' p# W0 D1.用feeder制备CM时需要加bFGF不？
2 s1 G3 Y9 N7 N6 ?  o) |2.是每天收集一次，大约能收集一周的CM吗？8 L, c! R+ i! k9 V
3.收集完之后需要离心或是0.45um滤器过滤吗？
! k4 U3 X9 J! b" x; G; U0 S哦，对了，我是将matrigel以1:30的比例与F12稀释，铺板，然后4°C过夜处理。希望高手赐教！[size=5]

hcluo

我记得condition medium都是用来做分化的，不知道你是从哪得到的文献是维持ES活性的，可以提供以下吗？另外，我们实验室在培养ES时，一般就是配置ES basic medium，一般不需要加入其它的因子，另外，feeder cells也很重要，最好使用MEF作为饲养层，而且注意传代的时间，不可拖得太长。另外，顺便问一下，你的ES是什么型号的？

hcluo

我记得condition medium都是用来做分化的，不知道你是从哪得到的文献是维持ES活性的，可以提供以下吗？另外，我们实验室在培养ES时，一般就是配置ES basic medium，一般不需要加入其它的因子，另外，feeder cells也很重要，最好使用MEF作为饲养层，而且注意传代的时间，不可拖得太长。另外，顺便问一下，你的ES是什么型号的？

天山水

强势围观
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开心果王

多谢楼上的朋友们支持。我们养是H9，matrigel上养ES可以用Tesr medium，不过很贵！如果在Feeder free状态下培养ES用basic medium很容易分化！