pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

anla0

pri-miRNA克隆的长度大概在500bp左右，前后各延伸200bp.0 e* a  E1 N/ N2 k% O5 j; c! [
请教：miRNA表达时用什么载体？较好的都有哪些？我们现在用pSUPER,想换个载体。4 T: ?/ k. y# F" N! [, i" ?
各位前辈不吝赐教。。。

sannia

我是加poly A的，你说的那种方法我没有做过。我倒是建议你可以设计两条引物，都试试。  s5 q9 O& w9 @; I# q& H# q
我马上要出去度假了，回来后我们可以讨论讨论 呵呵

runsong

回复 runsong 的帖子4 q8 p" S' a/ p
1 P& w1 _  F% g1 J
请问你们检测miRNA表达时用的是什么引物，是加poly a还是用颈环引物。但颈环引物有两个系统，不太一样，我发了相关的帖子，不知前辈有何见解。

runsong

回复 sannia 的帖子/ @2 p$ I1 ]1 Q5 j' P' i; l. c; q
# m* w. g; r7 P$ |8 W; I( H
我这么做只是因为经费问题，如果经费充足的话最好卖载体，或用慢病毒载体。
7 f0 t: K+ b8 S8 v1 H( V用模拟物也很好，不过比较贵，转染试剂最配套另卖。

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用+ _/ _* u$ \8 f4 G0 E3 S
以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用8 J. j- D( l4 U5 @
以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
$ O' U  P3 [' r& i! j' S) g2 k以后多交流

sannia

感谢之至！

runsong

附件

runsong

回复 sannia 的帖子
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我是按照深海寂寞鱼的方法做的，附件里有全部资料，不清楚的话再联系我。