帮忙看看我的MEF细胞正常吗

ada800515

刚开始做干细胞方面的实验，没有经验，以前没养过MEF细胞，这是别人给我的MEF细胞，想问一下现在这个状态正常吗？是否能使用？

sycdesc

密度和细胞形态不怎么好啊，传代多少次了？三次以内的话，在培养液里适当增加血清比例试试，三代以后做饲养层不好了啊

purplecookie

看着细胞比较老，密度很低。
$ f6 I- m1 H9 }6 H" n9 k* U5 E1 A# E9 U; m+ H- S
如果是要用做feeder的话，肯定不行。

igdb

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+ e5 h9 M5 f0 E9 F/ l# P
" s) ?' q. z( p$ {' N, v1 A5 Q4 c感觉细胞状态不是很好。有次我做的MEF跟这个情况是一样的，感觉就跟细胞不纯一样。。

igdb

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  A, o2 D" I& [
7 O) }; G) Q- {% [密度大的时候就会变的细长。。密度小的时候还真是什么形状的都有。。

lemma710

回复 ada800515 的帖子( P# U% A" Z- d  O/ Q4 L
8 F7 Z9 A% w* B" r6 T/ @( y
成纤维细胞应该是细长的，成梭形的吧~我养的细胞是这样的，不知道是不是
% ?" i' e5 ], {0 I- I, S6 K要是想用的话，可以先拿一小部分细胞做个预实验么~

cigoo

细胞感觉脏脏的，如果要传代，稍微传稀点可能会好些。你的培养条件可能细胞还不适应，比如：血清种类，浓度和品牌批次等等，建议再传传看。传代后不要频繁动或者对细胞进行操作。
6 l7 o# g) y, w4 D你的细胞初看上去极有可能是传过很多代了。做个转染看看转染率

ada800515

谢谢楼上的指点，我想知道的是细胞的形态是否对，比如是否像成纤维细胞啊？图一应该是3代吧，图四是四代冻存后又复苏的，刚复苏可能数量有点少，实验室养小鼠不方便，所以要是可以用的话想用。

lemma710

感觉细胞很老了已经，估计已经传了很多代了，分化了，建议不要使用，MEF最好使用P3或P4的好一点

shewawa

也不知道楼主这是多少passage了。图2，3细胞密度好像很低。图1，细胞状态不是很好，不丰盈，感觉像是我没空换细胞液准备扔掉的细胞。建议传代培养试试看。那个2，3多培养几天再看看吧。不过要是我这些细胞就都扔了，练习着玩玩还可以用用。