帮忙看看我的MEF细胞正常吗

ada800515

刚开始做干细胞方面的实验，没有经验，以前没养过MEF细胞，这是别人给我的MEF细胞，想问一下现在这个状态正常吗？是否能使用？

sycdesc

密度和细胞形态不怎么好啊，传代多少次了？三次以内的话，在培养液里适当增加血清比例试试，三代以后做饲养层不好了啊

purplecookie

看着细胞比较老，密度很低。
; C! q0 o1 ?. S
4 s+ X% j3 n& m, e6 K' `2 W如果是要用做feeder的话，肯定不行。

igdb

回复 ada800515 的帖子
  \4 ?, D7 a" l4 P! M" B/ r% c- s
感觉细胞状态不是很好。有次我做的MEF跟这个情况是一样的，感觉就跟细胞不纯一样。。

igdb

回复 lemma710 的帖子( M& m  R9 C1 D. s
& B7 y/ m0 I; G$ @8 D" m" d
密度大的时候就会变的细长。。密度小的时候还真是什么形状的都有。。

lemma710

回复 ada800515 的帖子$ d6 Q7 U! r7 K- r3 K

$ }) X, k/ J7 k, r; q成纤维细胞应该是细长的，成梭形的吧~我养的细胞是这样的，不知道是不是6 o8 b/ x% f1 V# b, u; [
要是想用的话，可以先拿一小部分细胞做个预实验么~

cigoo

细胞感觉脏脏的，如果要传代，稍微传稀点可能会好些。你的培养条件可能细胞还不适应，比如：血清种类，浓度和品牌批次等等，建议再传传看。传代后不要频繁动或者对细胞进行操作。
/ r/ ^' N8 ]6 @% c& Z" A- G' ]5 l你的细胞初看上去极有可能是传过很多代了。做个转染看看转染率

ada800515

谢谢楼上的指点，我想知道的是细胞的形态是否对，比如是否像成纤维细胞啊？图一应该是3代吧，图四是四代冻存后又复苏的，刚复苏可能数量有点少，实验室养小鼠不方便，所以要是可以用的话想用。

lemma710

感觉细胞很老了已经，估计已经传了很多代了，分化了，建议不要使用，MEF最好使用P3或P4的好一点

shewawa

也不知道楼主这是多少passage了。图2，3细胞密度好像很低。图1，细胞状态不是很好，不丰盈，感觉像是我没空换细胞液准备扔掉的细胞。建议传代培养试试看。那个2，3多培养几天再看看吧。不过要是我这些细胞就都扔了，练习着玩玩还可以用用。