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帮忙看看我的MEF细胞正常吗 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-1-6 09:54 |只看该作者 |正序浏览 |打印
刚开始做干细胞方面的实验,没有经验,以前没养过MEF细胞,这是别人给我的MEF细胞,想问一下现在这个状态正常吗?是否能使用?
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发表于 2011-1-8 13:52 |只看该作者
密度和细胞形态不怎么好啊,传代多少次了?三次以内的话,在培养液里适当增加血清比例试试,三代以后做饲养层不好了啊
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发表于 2011-1-6 15:42 |只看该作者
看着细胞比较老,密度很低。
; C! q0 o1 ?. S
4 s+ X% j3 n& m, e6 K' `2 W如果是要用做feeder的话,肯定不行。
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发表于 2011-1-6 12:46 |只看该作者
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回复 ada800515 的帖子
  \4 ?, D7 a" l4 P! M" B/ r% c- s
感觉细胞状态不是很好。有次我做的MEF跟这个情况是一样的,感觉就跟细胞不纯一样。。
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发表于 2011-1-6 12:44 |只看该作者
回复 lemma710 的帖子( M& m  R9 C1 D. s
& B7 y/ m0 I; G$ @8 D" m" d
密度大的时候就会变的细长。。密度小的时候还真是什么形状的都有。。
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地板
发表于 2011-1-6 11:24 |只看该作者
回复 ada800515 的帖子$ d6 Q7 U! r7 K- r3 K

$ }) X, k/ J7 k, r; q成纤维细胞应该是细长的,成梭形的吧~我养的细胞是这样的,不知道是不是6 o8 b/ x% f1 V# b, u; [
要是想用的话,可以先拿一小部分细胞做个预实验么~
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报纸
发表于 2011-1-6 10:59 |只看该作者
细胞感觉脏脏的,如果要传代,稍微传稀点可能会好些。你的培养条件可能细胞还不适应,比如:血清种类,浓度和品牌批次等等,建议再传传看。传代后不要频繁动或者对细胞进行操作。
/ r/ ^' N8 ]6 @% c& Z" A- G' ]5 l你的细胞初看上去极有可能是传过很多代了。做个转染看看转染率
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板凳
发表于 2011-1-6 10:51 |只看该作者
谢谢楼上的指点,我想知道的是细胞的形态是否对,比如是否像成纤维细胞啊?图一应该是3代吧,图四是四代冻存后又复苏的,刚复苏可能数量有点少,实验室养小鼠不方便,所以要是可以用的话想用。
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藤椅
发表于 2011-1-6 10:49 |只看该作者
感觉细胞很老了已经,估计已经传了很多代了,分化了,建议不要使用,MEF最好使用P3或P4的好一点
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沙发
发表于 2011-1-6 10:30 |只看该作者
也不知道楼主这是多少passage了。图2,3细胞密度好像很低。图1,细胞状态不是很好,不丰盈,感觉像是我没空换细胞液准备扔掉的细胞。建议传代培养试试看。那个2,3多培养几天再看看吧。不过要是我这些细胞就都扔了,练习着玩玩还可以用用。
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