小鼠骨髓间充质干细胞形态问题

feiyang

请教大家！我养的小鼠骨髓MSC，原代贴壁形态比较好，绝大多数都是梭形的小小的，但是传代后，P1就出现较多非常扁平而且变大的有伪足的细胞，梭形的就少了。请问这种现象正常吗？我分别用10％FBS和20％FBS养，都是这种情况。

liujucool

实验室养的骨髓间充质细胞也是出现楼主讲的情况，但我们一般在2代、3代出现非常扁平而且变大的有伪足的细胞，梭形的就少了，到了5代细胞增殖能力很差，长两周都长不满25cm2的瓶子，哪位大侠帮忙解答迷津

luoziwei

一般来说，鼠科的BMSC最好用3代以内实验，代数高了不但老化还不容易诱导分化，你们养的细胞已经很好了，建议就是多杀几只老鼠，多做原代，减少传代次数，维持MSC的特性才是最重要的

小熊不杀生

回复 feiyang 的帖子
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20%血清浓度在原代培养时比较好，传代之后建议常规10%血清就可以了，还有就是提早传代，不要等长满瓶了才传，这样的细胞很容易老化，注意控制胰酶消化时间，基本3-5min就可以，时间长的就不一定是BMSCs了

小熊不杀生

回复 liujucool 的帖子6 G1 ~9 y& @8 F3 }. b6 c( ~  k
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也有文献说，外观扁平、多伪足的BMSCs也有较好的分化、增殖能力，但是我自己的经验不是这样的，想做诱导分化的必须选在细胞状态好的时候，我通常用2代、3代

asejon

我做的实验也是经常会出现较多非常扁平而且变大的有伪足的细胞，梭形的也不少，诱导分化没问题，但是做流式的数据就惨不忍睹了@弄不明白扁平而且变大的细胞是不是MSCs，还是巨噬细胞？

Andre1989

胎盘原代培养如何避免有杂细胞产生